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文献和实验1/3~1/5的膜;透过目标物,孔径应选5-10倍的膜。 【求助】准备用millipore 的超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白,在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子,但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是Amicon Ultra 15ml规格的管子,不知道有没有谁以前做过的,有关于转速,时间给一些建议,另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理?离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失?如果要把管子重复利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是将其浸到乙醇中防于4度,还是在管子中灌入
7)和夹子 (2)1升的烧杯 (3)1 X PBS (4)100mM PMSF (5)7ml浓缩后的折叠复合物 2. 试剂:生物素化缓冲液: 100mM Tris(PH7.5) 200mM NaCl 5mM MgCl 【操作步骤】 (1)将1升生物素化缓冲液加入1升的烧杯中,并放一个磁力搅拌棒于其中。冷却至4℃。
纤维超滤柱 大规模生产时做菌体收集用,要配合大蠕动泵及压力表。 小规模研发时也有用做浓缩的,但感觉死体积比较大。 (5)高速冷冻离心机 小试、中试菌体收集用,破菌后离心,包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。推荐品牌:BECKMAN、日立、Eppendorf (6)磁力搅拌器 就是搅拌用了。缓冲液配制,包涵体溶解等。推荐品牌:国产的都行,最好配4或6工位的。 (7)真空泵 离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。推荐品牌:Millipore WP61型。 (8)过滤
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