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430166康宁培养皿Corning组织培养处理TC表面D×

H60mm×15mm灭菌
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  • ¥1266.36
  • Corning
  • 430166
  • 康宁
  • 2025年07月13日
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    • 供应商

      康宁

    • 规格

      430166

    Corning® 经组织培养处理的培养皿
    D × H 60 mm × 15 mm

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    • 人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南

      台中,使用体积设置为 10 µL的无菌 20 µL 移液器吸头从 60 mm 培养皿中6个较完整的类器官,并将其转移到 96 孔 U 型底板的 1 个孔中。 6. 将 96 孔板从解剖台转移到组织培养超净台中。 注意:为避免 ECM基质胶过早凝胶化,我们建议一次制备不超过 3 个细胞培养小室。      1. 将 60 µL 冷的 100%的减生长因子(GFR) ECM基质胶加入步骤 5 中的 96 孔板的每个孔中。通过移液器轻轻混合几次,避免产生任何气泡。 总体积 = 每孔130 µL。      

    • 基因转移

      。为使转化效率达到最高,质粒DNA应用CsCl-溴化乙锭密度梯度平衡离心法纯化。如果所用DNA量较少,应加入载体DNA将DNA浓度调至40μg/ml。实验室制备的真核载体DNA转染效率通常要比商品化的牛胸腺DNA、鲑鱼精DNA高。载体DNA用前应通过乙醇沉淀或氯仿抽提进行灭菌。   (2)转染前24h用胰蛋白酶进行消化以获得对数生长期的细胞,以1~2×105 细胞/cm2 的密度重新种入60mm组织培养皿中。在37℃、5%~7%CO2 及一定湿度的培养箱中培养20~24h。   

    • 原生质体分离与体细胞杂交

      . 将原生质体密度调整为4E+5个/ml的原生质体悬浮液备用; c. 在1个60×15mm培养皿中滴1滴(2-3ml)硅液200,然后在硅液上面放一张22×22mm的盖片; d. 将叶片原生质体和悬浮细胞原生质体等体积(一般各0.5ml)混合,然后用吸管吸取大约150μl原生质体悬浮液置于盖玻片上。静止大约5 min,以使原生质体沉降在盖片上形成一个薄层; e. 然后在原生质体悬浮液中,加入等体积的PEG溶液(50% PEG1540,10.5mmol/L CaCl2·2H

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