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文献和实验称量 0.1 克 (配成 100ml 溶液) — 即解决无菌分装药品的问题。其次要注意即使是 01. 的溶液,明胶也难溶,因此要充分摇匀,过夜放置,然后无菌分装入 50ml 小瓶中, 4℃ 保存。注意事项: 1.配制溶液时必须用新鲜的蒸馏水。 2.安装蔡式滤器时通常使用孔径 0.45 微米 和 0.22 微米滤膜各一张,放置位置为 0.45 的位于 0.22 微米的滤膜上方,并且要特别注意滤膜光面朝上。 3.配制 RPMI1640 培养基时因为还要加入小牛血清,而小牛血清略偏
器、kimwipe绵纸或外科纱布、9cm 塑料皿、工作液、移液管和手动移卵管等。所有的手术器械在使用前应该彻底清洗,70%乙醇消毒或高热灭菌处理。(2)受体母鼠的准备输卵管转移的受体鼠应该为4-6周龄大小,体重在20-25克左右,严禁用低体重以及超重母鼠,若体重较低,其体能不足以维持妊娠,可能导致受精卵的重新吸收;若体重较重,麻醉剂被吸收入脂肪组织,降低麻醉效果,可能使手术困难,而且脂肪组织的存在意味着静脉的存在,所以手术时切掉脂肪组织可能导致不必要的出血,难以确认手术时的操作对象。出血也可能堵塞移卵管。选择
。 2、LB固体培养基:液体培养基中每升加12g琼脂粉,高压灭菌。 3、 氨苄青霉素(Ampicillin, Amp)母液:配成 50mg/ml水溶液, -20℃保存备用。 4、 溶菌酶溶液: 用10mmol/L Tris·Cl(pH8.0)溶液配制成10mg/ml,并分装成小份(如1.5ml)保存于-20℃,每一小份一经使用后便予丢弃。 5、 3mol/l NaAc (pH5.2): 50ml水中溶解40.81g NaAc·3H2 O,用冰醋酸调pH至5.2, 加水定容
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