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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
49
- 供应商:
上海西格
- 规格:
500ml
| 产品名称 | Hyclone DMEM (低) | 货号 | XG-PYJ8267 |
| 英文名称 | 见说明 | 产品规格 | 500ml |
| 用途 | 仅供科研实验 | 货期 | 现货 |
制备培养基的基本方法和注意事项:
1,配方的选定:同一种配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。 2,制备记录:每次制备均应有记录,包括名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,最终ph值,消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的一同存放,以防发生混乱。
3,成分的称取:各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,最好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。
4,各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入其中,使细菌不易生长。最好使用不锈钢锅加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时,可先用温水加热并随时扰动,以防焦化,如发现有焦化现象,该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如为琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,最后必须加以补足。
培养基的使用步骤:
1.琼脂培养基的融化
将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min),以免玻璃容器发生破裂。
融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温,冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用,放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特 别是灵敏性培养基,应根据相关标准,缩短融化后放置的时间。
将琼脂培养基倒入类似检测培养使用的独立容器中,插入温度计,记录并保存琼脂的融化温度。
加入样品的培养基应将温度调节到44℃~47℃,或按照相关标准调节温度。
2.培养基的脱气
必要时,在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。
3.添加成分的加入
对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。将添加成分慢加入培养基并充分混匀,尽快分装到待用的容器中。
4.培养基的弃置
所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。
公司正在出售的产品:
RBP5 Protein Human 重组人 RBP5 / Retinol binding protein 5 蛋白 (His 标签)
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文献和实验感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从10ml扩大到100L。一般来说,悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售,比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Systems等,用起来都不错,尽管由于细胞株和目的蛋白的不同,效果有所差异。 最好是将目的蛋白和细胞株用不同的培养液做一个表达试验,选出表达效果最好的一种培养液。在进行这个表达
感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从 10ml 扩大到 100L 。一般来说,悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售,比如 Life Technologies 、 Hyclone 、 Biowhitaker 、 JRH Biosciences 、 Expression Systems 等,用起来都不错,尽管由于细胞株和目的蛋白的不同,效果有所差异。 最好是将目的蛋白和细胞株用不同的培养液做一个表达试验,选出表达效果最好
(依此类推)。 15、将收集的类器官转移到 5 ml Eppendorf 管中并放在冰上,4℃ 条件下 220g 离心 5min。 16、去除离心上清,并添加 37℃ 预热的 TrypLE Express(含 10μM Y27632)。轻轻旋转 Eppendorf 管,使类器官与 TrypLEExpress 混合均匀。 17、37℃ 条件下将类器官与 TrypLE 孵育 10min(致密型类器官)或 5min(低粘性和囊性类器官)。 18、加入 500μl 预冷的 DMEM/F12 终止消化,4℃
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