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53
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上海联祖
- 规格:
500ml
英文名称:见说明
产品规格:500ml
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ5150 | 500ml | 1~3天 | 仅供科研实验 |
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
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文献和实验感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从10ml扩大到100L。一般来说,悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售,比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Systems等,用起来都不错,尽管由于细胞株和目的蛋白的不同,效果有所差异。 最好是将目的蛋白和细胞株用不同的培养液做一个表达试验,选出表达效果最好的一种培养液。在进行这个表达
感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从 10ml 扩大到 100L 。一般来说,悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售,比如 Life Technologies 、 Hyclone 、 Biowhitaker 、 JRH Biosciences 、 Expression Systems 等,用起来都不错,尽管由于细胞株和目的蛋白的不同,效果有所差异。 最好是将目的蛋白和细胞株用不同的培养液做一个表达试验,选出表达效果最好
(依此类推)。 15、将收集的类器官转移到 5 ml Eppendorf 管中并放在冰上,4℃ 条件下 220g 离心 5min。 16、去除离心上清,并添加 37℃ 预热的 TrypLE Express(含 10μM Y27632)。轻轻旋转 Eppendorf 管,使类器官与 TrypLEExpress 混合均匀。 17、37℃ 条件下将类器官与 TrypLE 孵育 10min(致密型类器官)或 5min(低粘性和囊性类器官)。 18、加入 500μl 预冷的 DMEM/F12 终止消化,4℃
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