辰辉创聚生物®全流程VHH纳米抗体开发服务

 

背景介绍

纳米抗体一种来源于骆驼科动物体内、天然缺失轻链的重链抗体可变区，分子质量只有15kDa，是常规抗体分子质量的1/10。其蛋白质晶体结构长度为4 nm，直径为2.5 nm，是目前已知分子质量最小的抗体，因此称之为纳米抗体。

 

相比于传统抗体（图1a），纳米抗体（图1b）的活性结合区域较长，氨基酸数量多达16~18个，且其温度稳定性及有机溶剂耐受性更强，部分还可耐受蛋白酶，也能耐受更广的酸碱范围（传统抗体仅耐受pH6~9，纳米抗体可耐受pH2~11）。基于其稳定性、穿透力等方面的优势，目前纳米抗体在疾病治疗、诊断及物质检测等领域广受关注。

 

 

图1 传统抗体与纳米抗体的对比

 

 

服务内容

 

辰辉创聚生物®可提供：包括抗原制备、羊驼免疫、VHH纳米抗体噬菌体文库构建、VHH纳米抗体淘选全流程服务。

 

项目	内容	周期	交付标准
抗原制备（可选）	Ø基因合成 Ø质粒构建 Ø表达纯化 Ø质检	2-3周	Ø1-10mg抗原蛋白 ØSDS-PAGE纯度＞85% Ø内毒素＜1EU/mg
羊驼免疫	Ø免疫4次 Ø采血 Ø检测每次血清效价 Ø羊驼外周血PBMC提取	8-12周	Ø羊驼外周血PBMC Ø提供血清效价数据 ØIgG效价达1：10^5
免疫文库构建	ØRNA提取 ØcDNA制备 ØPCR扩增纳米抗体可变区 Ø连接载体并电转化 Ø计算库容量 Ø测序验证多样性	5周	Ø库容量达到10^8～10^9 Ø细菌库
免疫文库淘选	Ø噬菌体展示淘选 ØELISA/FACS筛选 Ø测序	4周	Ø提供10株以上抗体基因序列 Ø提供抗体氨基酸序列

 

辰辉创聚生物®提供千亿级天然纳米抗体库快速淘选服务，最快2周内获得候选分子。

 

项目	内容	周期	交付标准
抗原制备（可选）	Ø基因合成 Ø质粒构建 Ø表达纯化 Ø质检	2-3周	Ø1-10mg抗原蛋白 ØSDS-PAGE纯度＞85% Ø内毒素＜1EU/mg
天然文库淘选	Ø噬菌体展示淘选 ØELISA/FACS筛选 Ø测序	4周	Ø提供10株以上抗体基因序列 Ø提供抗体氨基酸序列

 

此外，辰辉创聚生物®还提供亲和力成熟、抗体人源化、重组抗体构建表达及克级生产服务，欢迎咨询。