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- mlBio/酶联生物
- ml-G13112
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- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 库存：
513
- 英文名：
DH5α大肠杆菌克隆菌株
- 运输方式：
快递运输
- 规格：
100μl
| 菌株名称 |
|
| 菌株品牌 |
酶联生物 |
| 细胞规格 |
100μl |
| 细胞储存 |
-20℃ |
| 基 因 型 |
F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA |
| 菌株抗性 |
无 |
| 培 养 基 |
LB |
| 菌株类别 |
大肠杆菌克隆菌 |
| 培养条件 |
37℃，有氧，LB |
| 质粒转化 |
42℃热激 |
| 保存方式 |
20%甘油，-20℃ |
| 基本应用 |
用于基因克隆 |
| 菌株简介 |
DH5α菌株是实验室最常用的菌株。 缺失核酸内切酶(endA)，提高了质粒DNA的产量和质量；重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率，保证了插入DNA的稳定性；DH5α在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和DH5α编码的lacZ△M15相结合，从而显示β半乳糖苷酶活性 (α-互补性)，使DH5α;可用于蓝、白斑筛选。DH5α可以用于制作基因库、进行亚克隆，同时由于DH5α具有deoR变异，可以作为较大质粒的宿主菌使用。DH5α菌株的缺点是生长缓慢，37℃需培12-14小时才能看见克隆。 |
| 供应范围 |
仅供限于科研实验研究使用 |
| 运输方式 |
低温快递运输 |
| 菌株优势 |
酶联生物菌株库拥有200种菌株 , 遗传性状一致 |
| 特别说明 |
细胞购买/细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买，请立即与酶联生物联系 |
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文献和实验相关专题 大肠杆菌的基因工程 Xl1-Blue菌株 基因型：endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F‘[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。 特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。 用途：分子 克隆和质粒提取。 DH5α菌株 基因
苄青霉素的平板培养基上培养，只有转化体才能存活，而未受转化的受体细胞则因无抵抗氨苄青霉素的能力而死亡。影响转化率的因素细胞生长状态和密度。转化的质粒 DNA 的质量和浓度。试剂的质量。防止杂菌和其它外源 DNA 的污染。离心设备 实验试剂 大肠杆菌DH5α LB培养基， 0.1mol/LCaCl2溶液（预冷） 氨苄青霉素 pUC18质粒 实验步骤 菌株活化: 1.用接种环直接取冻存的大肠杆菌DH5α，在LB培养基平板表面划线，于37℃培养16小时 2.挑取一个单菌落，转到3－
臂区域如果 GC 含量过高过低，或者有重复序列，都可能在核酸外切酶切割后形成发卡结构，影响重组效率，可以使用质粒设计软件来检查同源重组臂的设计。 ⑤插入序列本身的问题：有些序列本身存在连接载体困难、连接产物不稳定、连接产物在大肠杆菌中复制困难等问题。对于这类序列可以考虑将序列打断后分步构建，或者更换载体或感受态的方式尝试解决。 2. 质粒提取量不足 质粒提取量少常见的原因可能是： ①摇菌时间过长：大肠杆菌生长已经超过对数期，细菌老化，导致细胞和 DNA 降解。 ②摇菌时间不足：细菌生长不充分
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