小鼠视网膜色素上皮细胞 原代细胞 (带荧光鉴定)

小鼠视网膜色素上皮细胞 原代细胞 (带荧光鉴定)

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  • ¥1890 - 2980
  • 华尔纳生物
  • W-49122
  • 武汉
  • 2025年07月12日
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      武汉华尔纳生物科技有限公司

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    • 英文名

      小鼠视网膜色素上皮细胞

    小鼠视网膜色素上皮细胞/小鼠视网膜色素上皮细胞/小鼠视网膜色素上皮细胞
    细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务   (养不活无理由全额退款)

    细胞蓝色图

    • 传代特性:

      不建议传代

    • 产品名称:

      小鼠视网膜色素上皮细胞

    • 组织来源:

      眼组织

    • 种属来源:

      小鼠

    • 规格:

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 细胞形态:

      上皮细胞样


    小鼠视网膜色素上皮细胞
    一、细胞基本属性
    细胞名称
    小鼠视网膜色素上皮细胞
    组织来源
    眼组织
    商品货号
    ORCM301
    种属来源
    小鼠
    产品规格
    5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介
    小鼠视网膜色素上皮细胞分离自眼组织;视网膜色素上皮为一层矮六角棱柱状细胞,高8~10μm,宽12~18μm。细胞顶部伸出许多长5~7μm的突起。在胚胎发生时,上皮基部和脉络膜紧密连接,但顶部与视细胞连接不紧,故易在此发生视网膜剥离。电镜观察,细胞之间有紧密连接、中间连接和缝隙连接,基底部有胞膜内褶和线粒体,故推测色素上皮有运输离子和屏障作用。胞核圆形,位于细胞基部。顶部胞质含许多椭圆或圆形的黑色素颗粒和含板层碎片的残余体。滑面内质网发达,分布于色素颗粒和残余体之间。有高尔基复合体、溶酶体、粗面内质网和脂滴。这些结构反映了色素上皮的多种功能:①色素颗粒由粗面内质网产生,经高尔基复合体转运至胞质顶部。已知两栖类和鱼类受强光照射时,色素颗粒移入突起中;处于黑暗时,色素颗粒又回到胞质中,这说明色素上皮有吸收光和保护视细胞免受强光刺激的作用;②脂滴有集聚和贮存维生素A的作用,通过滑面内质网的酯化与转运,参与视细胞合成视紫红质;③能吞噬脱落的视杆细胞外节膜盘,藉溶酶体酶水解消化,形成残余体;④分泌蛋白多糖,粘合和维持视杆、视锥与色素上皮的相互位置关系,从而保证视紫红质的更新和营养物质的传递。
    培养基
    ECM基础培养基,FBS,Penicillin,Streptomycin等;
    包被条件
    鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
    换液频率
    每2-3天换液一次
    生长特性
    贴壁
    细胞形态
    上皮细胞样
    传代特性
    不建议传代
    消化液
    0.25%胰蛋白酶
    培养条件
    气相:空气,95%;CO2,5%
     
    方法简介:实验室分离的小鼠视网膜色素上皮细胞采用酶液消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
    质量检测:实验室分离的小鼠视网膜色素上皮细胞经CK-8免疫荧光鉴定,纯度可达80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    小鼠视网膜色素上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
     
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法
    小鼠视网膜色素上皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈上皮细胞样 ,在技术部标准操作流程下,不建议传代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。   
          
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技
    术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核
     
    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

    注意事项

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