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小鼠肾实质细胞 原代细胞 （带荧光鉴定）

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  • ￥1890 - 2980
  • 华尔纳生物
  • W-60919
  • 武汉
  • 2025年07月12日
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    • 英文名：

      小鼠肾实质细胞

    小鼠肾实质细胞/小鼠肾实质细胞/小鼠肾实质细胞
    细胞代次低，活性高，品质保证，提供全程7*24小时专业技术指导售后服务   （养不活无理由全额退款）

    细胞蓝色图

    • 组织来源：

      肾组织

    • 细胞形态：

      成纤维细胞样

    • 种属来源：

      小鼠

    • 规格：

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 传代特性：

      可传1-2代

    • 产品名称：

      小鼠肾实质细胞


    小鼠肾实质细胞
    一、细胞基本属性
    细胞名称
    小鼠肾实质细胞
    组织来源
    肾组织
    商品货号
    ORCM056
    种属来源
    小鼠
    产品规格
    5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介
    小鼠肾实质细胞分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾脏移植是临床上治疗慢性肾功能衰竭的有效方法，然而这种方法受到供体肾短缺的限制。肾细胞移植可部分解决供体肾短缺的问题，是未来可以替代肾脏移植的最有效方法。因此，体外肾细胞的培养受到国内外有关专家的密切关注。原代肾细胞作为一种常用的肾脏毒理学研究对象，其分离方法主要有机械研磨分离法和酶消化法，酶消化法因对细胞损伤小、分离效果好而优于机械研磨分离法；目前常用的酶消化法主要是胰蛋白酶消化法和胶原酶消化法。
    培养基
    含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    换液频率
    每2-3天换液一次
    生长特性
    贴壁
    细胞形态
    成纤维细胞样
    传代特性
    可传1-2代
    消化液
    0.25%胰蛋白酶
    培养条件
    气相：空气，95%；CO2，5%
     
    方法简介：实验室分离的小鼠肾实质细胞采用胶原酶 - 胰蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
    质量检测：实验室分离的小鼠肾实质细胞经检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    小鼠肾实质细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
     
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法
    小鼠肾实质细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈成纤维细胞样，在技术部标准操作流程下，可传1-2代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
    3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
    4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
    3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基(补加1%FBS，促进贴壁)重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
    4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核 
    备注：由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同，以上方法仅供各实验室参考


    注意事项

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    • 原代细胞分离培养鉴定以及检测等整体课题服务

      37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； 二、新生SD大鼠心房肌细胞的α-actin免疫荧光鉴定：1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育

    • 原代细胞培养实验室组建的基本要求

      及保温效果会稍差；而水套式则利用浸泡在水中的电热丝加热包裹在箱体内胆外的水套来达到控温的效果，其升温慢但是保温的效果良好，即使短时间发生断电也不怕影响箱体内的细胞生长。3、倒置显微镜需要倒置显微镜的帮助。对于一些荧光免疫细胞实验（IF），则还需要购买倒置的荧光显微镜。4、纯水机/超纯水机细胞培养还需要超纯水系统，普通的纯水和蒸馏水是无法用于细胞培养的，而超纯水主要用于配置一些培养基和试剂，超纯水的进水可为自来水或二级纯水（质量好些的去离子水，电阻10兆欧左右），细胞培养用水除了超纯以外，最主要对内

    • 组织解离的常见问题及答案

      性选择不同强度的解离方式。 （1）根据肿瘤组织的坚硬度和目的细胞不同，可以选择合适的解离方案。 （2）剔除坏死/出血区域（剪刀精细修剪），保留活性肿瘤组织。 （3）由于肿瘤组织比较坚硬，会产生较多碎片和死细胞，影响下游实验可以通过Ficoll或者去死或碎片去除试剂盒（Debris Removal Solution，130-109-398）优化肿瘤样本。   6. 如何得到肝实质细胞？ 小鼠和大鼠的肝脏组织包含实质细胞和非实质细胞（Kupffer细胞、肝星状细胞、肝窦内皮细胞、胆管上皮细胞、免疫

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    449 人阅读发布时间：2023-02-14 12:58

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