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大鼠星形胶质细胞 原代细胞 (带荧光鉴定)

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  • ¥1890 - 2980
  • 华尔纳生物
  • N-54449
  • 武汉
  • 2025年07月15日
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    • 英文名

      大鼠星形胶质细胞

    大鼠星形胶质细胞/大鼠星形胶质细胞/大鼠星形胶质细胞
    细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务   (养不活无理由全额退款)

    细胞蓝色图

    • 组织来源:

      脑组织

    • 细胞形态:

      星状细胞

    • 种属来源:

      大鼠

    • 规格:

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 传代特性:

      根据细胞特性传代

    • 产品名称:

      大鼠星形胶质细胞


    大鼠星形胶质细胞 
    一、细胞基本属性
    细胞名称 大鼠原代星形胶质细胞
    组织来源 脑组织
    商品货号 ORCR474
    种属来源 大鼠
    产品规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
     
     
     
     
     
    细胞简介
    星形胶质细胞 ,是胶质细胞中体积最大的一种。从胞体发出许多长而分支的突起 ,伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间 ,起支持和分隔神经细胞的作用。
    纤维性星形胶质细胞多分布在脑脊髓的皮质 ,突起细长 ,分支较少 ,胞质中含 , 多分布在灰质 ,细胞突起粗短 ,分支多。胞质内胶质丝较少 ,又称苔状细胞。  电 镜下星形胶质细胞的胞核有缺失 ,胞质较清亮 ,游离核糖核蛋白体和粗面内质网 均很少 ,糖原颗粒丰富 ,有大量的胶质丝。纤维形星形胶质细胞的突起呈长圆柱 形 ,而原浆性星形胶质细胞的突起呈薄片状 ,并常包裹着神经细胞及其突触。星 形胶质细胞的脚板与血管内皮细胞之间相隔一层基板 ,脚板质膜与基板接触处有 半桥粒结构。
    培养基 原代星形胶质细胞培养体系
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁生长
    细胞形态 星状细胞
    传代特性 根据细胞特性传代
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:空气 ,95%;  CO2 ,  5%
    质量检测:实验室分离的大鼠原代星形胶质细胞经神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染 色法 ,纯度可达90%以上 ,且不含有HIV-1、  HBV、  HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    大鼠原代星形胶质细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。   
    二、细胞培养状态 
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法 
    在技术部标准操作流程下 ,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。 
    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化 
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化; 
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。 
    3. 悬浮细胞处理        
    1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中 ,  用PBS清洗细胞培养瓶1 - 2次 ,收集清洗 液;
    2) 1200 - 1500rpm离心3min , 弃上清 ,收集细胞沉淀;
    3)加入5ml 新鲜完全培养基 , 用吸管轻轻吹打混匀 、 分散细胞;  将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中 ,  置于37°C 、   5 % CO2 、  饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;              
    4)若遇到悬浮细胞团块较大 , 无法机械吹散时 ,   向步骤2)中细胞沉淀添加0 . 25%胰蛋白酶消  化液2m L至离心管中 ,  用吸 - 管轻轻吹打混匀 ,37°C温浴2 - 3 min ,  消化结束后 ,  加入胰酶抑 制剂(或血清)终止消化 ,  用吸管轻轻吹打 ,  分散细胞;   1200rpm离心5min , 弃上清 ,收集细胞沉淀;
    5)加入5ml 新鲜完全培养基 ,  用吸管轻轻吹打混匀;  按传代比例进行接种传代 ,然后补充 新鲜的完全培养基至5m L ,  置于37°C 、   5 % CO2 、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;   
    6)待细胞状态稳定后 ,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
    4. 细胞收货脱落 
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    5. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。         
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。 
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核 
    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
     

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