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- mlBio/酶联生物
- ml-G13083
- 国内
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海酶联生物科技有限公司
- 库存：
484
- 英文名：
NMY51菌株
- 运输方式：
快递运输
- 规格：
100μl
| 菌株名称 |
|
| 菌株品牌 |
酶联生物 |
| 细胞规格 |
100μl |
| 细胞储存 |
-20℃ |
| 菌株抗性 |
无抗 |
| 培 养 基 |
YPDA |
| 菌株类别 |
酵母菌 |
| 培养条件 |
28℃，有氧，YPDA |
| 基 因 型 |
MATahisΔ200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZ ade2::(lexAop) 8-ADE2 GAL4 |
| 质粒转化 |
电转 |
| 保存方式 |
30%甘油，-20℃ |
| 基本应用 |
酵母双杂交 |
| 菌株简介 |
DUALmembrane系统是DUALsystems BioTech公司开发的专门筛选跨膜蛋白间相互作用的检测技术，它利用分离的泛素系统（split-ubiquitin）直接检测天然状态下膜蛋白间的相互作用，是目前市面上唯一检测膜蛋白间相互作用的酵母双杂系统。此系统采用NMY51酵母菌株，可直接转化质粒进行蛋白互作验证或筛库试验；此菌株Transformation marker为: trp1, leu2-3，报告基因为：HIS3, ADE2 和 lacZ，第一步通过营养缺陷型报告基因（HIS3, ADE2）进行选择性生长筛选，进一步通过 LacZ 报告基因进行β-半乳糖分析显色的定量或半定量筛选，三个独立的报告基因，受不同启动子的调控，降低假阳性几率。原理：泛素（ubiquitin）分子量很小，由 76aa 残基组成；泛素作为降解信号分子，可以连接另外一种蛋白质的 N 端，然后被泛素专一性蛋白酶（UBPs）识别，从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。泛素可以人为分成两部分：N 端（Nub），C 端（Cub）。首先，人为地将泛素 Nub 的 3 位异亮氨酸突变为甘氨酸（NubI 突变为 NubG）。这样与 Cub 的亲合力大大降低，避免了 Cub 和 Nub 自我结合或接近的可能性。其次，将Cub 部分与人工合成的 LexA-VP16 转录激活因子融合成一个融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常条件下 NubG不与Cub 结合，UBPs 也不能识别分离的泛素，转录激活因子也不会被切下来。最后，将要检测的蛋白质分别与NubG和Cub融合，形成 bait 融合蛋（bait-cub-LexA -VP16）和 prey 融合蛋白（prey-NubG）。如果 bait 和 prey发生相互作用，就会促使 NubG 和 Cub 的相互接近，被 UBPs 识别，导致 LexA-VP16 的解离，进入核内，从而激活报告基因的转录。 此系统可使用四种Bait质粒：pBT3-N，pBT3-SUC，pBT3-STE，pBT3-C，筛选标志均为LEU；三种Prey质粒：pPR3-C ，pPR3-SUC，pPR3-STE，筛选标志均为TRP。NMY51酵母菌株可用YPDA在28℃有氧的条件下培养，然后使用30%的甘油保藏菌种。 |
| 供应范围 |
仅供限于科研实验研究使用 |
| 运输方式 |
低温快递运输 |
| 菌株优势 |
酶联生物菌株库拥有200种菌株 , 遗传性状一致 |
| 特别说明 |
细胞购买/细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买，请立即与酶联生物联系 |
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文献和实验Membrane‐Based Yeast Two‐Hybrid System to Detect Protein Interactions
1×YPAD liquid medium (see recipe ) NMY51 yeast strain: MATa his3Δ200 trp1‐901 leu2‐3,112 ade2 LYS2::(lexAop) 4 ‐HIS3 ura3::(lexAop) 8 ‐lacZ ade2::(lexAop) 8 ‐ADE
。- 20 ℃ 可短期保存 3 周。请勿反复冻融。1,8 -二羟基蒽醌0.5 mL10.5 mL11 mg/mL，使用前混匀S9 混合物1.4 mL51.4 mL6使用前加 2.86 mL 冰冷灭菌蒸馏水复溶TA97 菌株5.0 mL15.0 mL1使用前混匀TA98 菌株5.0 mL15.0 mL1TA100 菌株5.0 mL15.0 mL1TA102 菌株5.0 mL15.0 mL1TA1535 菌株5.0 mL15.0 mL1 1. 诱导 S9 采用国际先进无菌冻干干燥工艺制成，实现了诱导 S9
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的院内感染率已在50％以上，已成为院内感染的重要病原菌之一。因此，开展对耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的检测，对于控制医院内的感染的流行。指导临床治疗有着十分重要的意义。 2 材料和方法 2.1 51株菌株均来自于临床标本，经常规分离鉴定得到，收集本院2006--09年间标本培养分离的金黄色葡萄球菌51株，其中金黄色葡萄球菌(SA)39株，凝固酶阴性的葡萄球菌 (CNS)12株。MRS阳性参考菌株ATCC(R
