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人输卵管上皮细胞 原代细胞 (带荧光鉴定)

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  • ¥2090 - 5290
  • 华尔纳生物
  • N-71748
  • 武汉
  • 2025年07月11日
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    • 英文名

      人输卵管上皮细胞

    人输卵管上皮细胞/人输卵管上皮细胞/人输卵管上皮细胞
    细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务   (养不活无理由全额退款)

    细胞蓝色图

    • 种属来源:

    • 规格:

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 传代特性:

      细胞特性确定传代

    • 产品名称:

      人输卵管上皮细胞

    • 组织来源:

      输卵管组织

    • 细胞形态:

      上皮样,多角形细胞


    人输卵管上皮细胞
    一、细胞基本属性
    细胞名称 人输卵管上皮细胞
    组织来源 输卵管组织
    商品货号 ORCH417
    种属来源
    产品规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
     
     
     
     
     
     
    细胞简介
    输卵管位于人体的盆腔内,一般的人有两条,  左、右输卵管各位于子宫一侧。它  们由子宫底外侧角部向外,平行伸展,先达卵巢的子宫端,再沿卵巢系膜缘上行  至卵巢的输卵管端,  且呈弓形而覆盖于卵巢上,然后向下、向内行,终止于卵巢  的游离缘及其内侧面上部。粘膜层的上皮为单层高柱状细胞所构成,上皮细胞可  分为4种不同类型:纤毛细胞、分泌细胞、楔形细胞和未分化细胞。  输卵管是卵子 运输、储存、获能,  以及卵母细胞采取、运送、成熟、受精和早期胚胎发育的重  要场所。输卵管上皮细胞体外培养可以用于饲养层细胞,  与胚胎共培养,克服胚  胎的发育阻滞现象。因此,体外培养输卵管上皮细胞,不但可以进一步了解影响  生殖微环境变化的因素,  而且还可以建立输卵管上皮细胞与胚胎共培养体系,研  究输卵管上皮细胞对胚胎体外发育的影响。
    培养基 原代上皮细胞培养体系
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁培养
    细胞形态 上皮样,多角形细胞
    传代特性 细胞特性确定传代
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    质量检测: 实验室分离的人输卵管上皮细胞经细胞角蛋白-17  (CK-17)免疫荧光染色为阳性,纯度可达90%以上,  且不含有HIV-1、  HBV、  HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    人输卵管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。     
    二、细胞培养状态 
    发货时发送细胞电子版照片  
    三、使用方法   
    在技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。  
    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。  
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。  
    2. 贴壁细胞消化 
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;  
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;  
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;  
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。  
    3. 悬浮细胞处理 
    1)收集T25细胞培养瓶中的培养基至50ml离心管中,用PBS清洗细胞培养瓶1-2次,收集清洗液;  
    2)1200-1500rpm离心3min,弃上清,收集细胞沉淀;
    3)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞;将分散好的细胞调整合适密度接种至培养器皿中,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)若遇到悬浮细胞团块较大,无法机械吹散时,向步骤2)中细胞沉淀添加0.25%胰蛋白酶消化液2mL至离心管中,用吸-管轻轻吹打混匀,37°C温浴2-3min,消化结束后,加入胰酶抑制剂(或血清)终止消化,用吸管轻轻吹打,分散细胞;1200rpm离心5min,弃上清,收集细胞沉淀;
    5)加入5ml新鲜完全培养基,用吸管轻轻吹打混匀;按传代比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    6)待细胞状态稳定后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。     
    4. 细胞收货脱落 
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;  
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;  
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;  
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。  
    5. 细胞实验 
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。         
    四、注意事项 
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。  
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。  
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。  
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。   
    5. 该细胞只可用于科研。   
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核    
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核   
    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
     

    注意事项

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    图标文献和实验
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      滤膜过滤;(2)再用IgG包被法。4 、PriCells的产品(1) 原代肺泡上皮细胞, 5×105 细胞数/1ml(2) 原代细胞分离试剂盒(3) 原代细胞分离鉴定盒(4) 原代上皮细胞特制基础培养基(5) 原代上皮细胞培养特制添加剂

    • 原代细胞的培养与建系

      适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上,再用PBS洗2~3次,以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的少许培养液(内含400单位/mL抗菌素)的小瓶等便于携带的物品来取材,所取材料应避免接触有毒有害的化学物质,如碘、汞等。 (3)取材和原代细胞制作时,要用锋利的器械,如手术刀或剃须刀片切碎组织,尽可能减少对细胞的机械损伤。 (4)要仔细去除所取材料上的血液(血块)、脂肪、坏死组织及结缔组织,切碎组织时应避免组织干燥,可在含少量

    • 原代细胞的培养和维持

      一、原代细胞的培养与维持1、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)凡经消化液处理实体组织来源的细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性,细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L,培养基可用Eagle(MEM)或DNEM培养,小牛血清浓度为10%~80%。在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮。贴壁细胞长成网状或基本单层时,由于营养缺乏,代谢产物增多,pH变酸,不适宜细胞生长,此时细胞还未长成单层,未达到饱和密度,仍需继续培养,因此,需采取换液方式来更新

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