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人肝窦内皮细胞 原代细胞 (带荧光鉴定)

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  • ¥2090 - 5290
  • 华尔纳生物
  • N-11440
  • 武汉
  • 2025年07月12日
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    • 英文名

      人肝窦内皮细胞

    人肝窦内皮细胞/人肝窦内皮细胞/人肝窦内皮细胞
    细胞代次低,活性高,品质保证,提供全程7*24小时专业技术指导售后服务   (养不活无理由全额退款)

    细胞蓝色图

    • 组织来源:

      肝脏组织

    • 细胞形态:

      内皮细胞样

    • 种属来源:

    • 规格:

      5×10⁵Cells/T25培养瓶

    • 传代特性:

      可传1-2代

    • 产品名称:

      人肝窦内皮细胞


    人肝窦内皮细胞
    一、细胞基本属性
    细胞名称
    人肝窦内皮细胞
    组织来源
    肝脏组织
    商品货号
    ORCH320
    种属来源
    产品规格
    5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介
    人肝窦内皮细胞细胞分离自肝脏组织;肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用;肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺,为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官,又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构:肝脏位于右上腹,隐藏在右侧膈下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁,肝上面则与膈及腹前壁相接。肝窦内皮细胞(SEC)是肝脏内所占比例最高的非实质细胞,位于肝窦腔与肝细胞之间,具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时,肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失,内皮下基膜形成,产生类似于连续型毛细血管的结构,这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起,其过程极复杂,在多种肝病的发病前期阶段均有出现,近年来受到广泛关注。
    培养基
    含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    包被条件
    PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
    换液频率
    每2-3天换液一次
    生长特性
    贴壁
    细胞形态
    内皮细胞样
    传代特性
    可传1-2代
    消化液
    0.25%胰蛋白酶
    培养条件
    气相:空气,95%;CO2,5%
     
    方法简介:实验室分离的人肝窦内皮细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法,并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
    质量检测:实验室分离的人肝窦内皮细胞经CD31、CD14免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    人肝窦内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
     
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    三、使用方法
    人肝窦内皮细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈内皮细胞样,在技术部标准操作流程下,可传1-2代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。   
          
    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技
    术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
    5. 该细胞只可用于科研。
    1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
    2)本产品未通过用于活体诊断的审核
     
    备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考

    注意事项

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 正常人脐静脉原代内皮细胞培养

      的透光性。2 、免疫组织化学鉴定 :利用 Ⅷ因子相关抗原检测(或利用CD31和CD33免疫荧光染色鉴别内皮细胞)。3、细胞爬片。将洗净的盖玻片放入 6 孔培养板中,接种细胞为 3 ×10 4 个/ 孔, 48 小时候细胞可以长满,用镊子取出铺满细胞的盖玻片备用。4、细胞固定:用 PBS 洗涤细胞,之后放入乙醇丙酮混合液中,固定 10min ,空气中自然干燥。5、特异性抗体:按照说明书稀释比要求稀释抗体,加入抗体,放置 37℃ 孵育 60min 。6、洗涤: 1 × PBS (pH

    • 如何培养脐静脉内皮细胞(HUVEC)?

      ,有可能会与某些实验设置之间存在冲突。在这种情况下,我们推荐使用不含 VEGF 的内皮细胞生长培养基。该培养基专门针对人类原代细胞进行优化,但也可用于牛、猪、小鼠、兔、象、狗和大鼠的大血管内皮细胞以及各种内皮细胞系。● 细胞分离试剂盒romoCell 细胞分离试剂盒的开发是为了用于温和和有效地分离培养中附着的人类原代细胞。每一产品批次均使用人类原代细胞进行检测。该试剂盒包括以下三种成分:1. HepesBSS (30 mM Hepes)2. 胰蛋白酶/EDTA溶液(0.04 % / 0.03

    • 原代细胞的培养与建系

      适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上,再用PBS洗2~3次,以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的少许培养液(内含400单位/mL抗菌素)的小瓶等便于携带的物品来取材,所取材料应避免接触有毒有害的化学物质,如碘、汞等。 (3)取材和原代细胞制作时,要用锋利的器械,如手术刀或剃须刀片切碎组织,尽可能减少对细胞的机械损伤。 (4)要仔细去除所取材料上的血液(血块)、脂肪、坏死组织及结缔组织,切碎组织时应避免组织干燥,可在含少量

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