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武汉华尔纳生物科技有限公司
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- 英文名:
人外周血淋巴细胞
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- 传代特性:
不增殖;不传代
- 产品名称:
人外周血淋巴细胞
- 组织来源:
血液组织
- 细胞形态:
圆形
- 种属来源:
人
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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人外周血淋巴细胞
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组织来源
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血液组织
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商品货号
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ORCH291
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种属来源
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人
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产品规格
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5×105cells/T25细胞培养瓶
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细胞简介
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人外周血淋巴细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。淋巴细胞(lymphocyte)是白细胞的一种,是体积最小的白细胞。其由淋巴器官产生,主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中,是机体免疫应答功能的重要细胞成分,是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者,是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵”。淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系,按其发生迁移、表面分子和功能的不同,可分为T淋巴细胞(又名T细胞)、B淋巴细胞(又名B细胞)和自然杀伤(NK)细胞。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞,它们的最初来源是相同的,都来自造血组织。T淋巴细胞随血循环到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B细胞在骨髓中分化成熟。当受抗原刺激后,T淋巴细胞即转化为淋巴母细胞,再分化为致敏T淋巴细胞,参与细胞免疫,其免疫功能主要是抗胞内感染、瘤细胞与异体细胞等;而B淋巴细胞是先转化为浆母细胞,再分化为浆细胞,产生并分泌免疫球蛋白(抗体),参与体液免疫,其功能是产生抗体,提呈抗原,以及分泌细胞内因子参与免疫调节;NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应,具有杀伤靶细胞的作用。
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培养基
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含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin
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换液频率
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每2-3天换液一次
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生长特性
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悬浮
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细胞形态
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圆形
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传代特性
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不增殖;不传代
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消化液
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0.25%胰蛋白酶
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培养条件
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气相:空气,95%;CO2,5%
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文献和实验利用右旋糖酐加速红细胞沉降,将富含白细胞的上层液用淋巴细胞分层液进行离心分离,使粒细胞沉于管底而与淋巴细胞和单核细胞分离。 (一)小量分离法 [试剂及配制] (1)6%右旋糖酐生理盐水 (2)聚蔗糖-泛影葡胺分层(D=1.077) (3)0.83% NH4 Cl溶液:取0.83g NH4 Cl、0.1g KHCO3 、0.0037g EDTA.Na2,蒸馏水加至100ml。 (4)0.1%白明胶Hank’s液。 [操作方法] (1)取3~10ml肝素
一、原代细胞的培养与维持1、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)凡经消化液处理实体组织来源的细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性,细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L,培养基可用Eagle(MEM)或DNEM培养,小牛血清浓度为10%~80%。在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮。贴壁细胞长成网状或基本单层时,由于营养缺乏,代谢产物增多,pH变酸,不适宜细胞生长,此时细胞还未长成单层,未达到饱和密度,仍需继续培养,因此,需采取换液方式来更新
组织应加入含10%二甲基亚砜的培养基,按细胞冻存方式于液氮中冷冻保存。(2)取材应严格无菌 所取标本材料应在无菌条件下进行,为了确保无菌,对所取材料若疑有污染的可能,应将所取组织在含高浓度抗菌素(400单位/mL)甚至加入适量的两性霉素B或10%达克宁液的培养液内于4℃下存放2小时以上,再用PBS洗2~3次,以确保所取材料无菌。要用无菌包装的器皿或事先消毒好的带少许培养液(内含400单位/mL抗菌素)的小瓶等便于携带的物品来取材,所取材料应避免接触有毒有害的化学物质,如碘、汞等。(3)取材和原代细胞






