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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
33
- 英文名:
RODAC
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
10个/包
中文名称:RODAC培养皿(TSA)(55mm)
英文名称:RODAC
产品规格:10个/包
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ5937 | 10个/包 | 1~3天 | 仅供科研实验 |
如何配置培养基:
1、配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。
2、调节pH值
用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。
4、分装
已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。
5、加棉塞
分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
6、制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。
培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
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文献和实验要1个60mm培养皿,产量与细胞量有指数增长规律。以下以一个75ml培养瓶为例。 1、在培养液中用scraper将细胞刮下,900r/min 离心6min,弃上清 2、用2ml Buffer A 重悬细胞,洗涤一次,900r/min 离心6min,弃上清 3、重悬于10倍体积Buffer A(约1ml),冰上放置10min 4、将悬液转入玻璃匀浆器,研磨5组,每组转15圈。(每组间隔将磨杵拔出,使管内上下受到 的研磨均匀) 此步为关键步骤,用力不要太小,要感
4、5.55 mmol/L 葡萄糖、10 mmol/L HEPES、1 mmol/L CaCl2 和1 mmol/L MgCl2 ; 5. 培养液:ROMI1640,添加10%FBS、25 mmol/L 谷氨酰胺、25 mmol/L HEPES、100000 IU/L青霉素和100mg/L庆大霉素。pH7.2; 6. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊,止血钳; 7. 离心管(15ml、50ml) 8. 网筛:0.75mm不锈钢滤网 实验方法: 1. 乙醚麻醉后,放血
(1M) β-巯基乙醇(55Mm) PEST LIF复苏细胞细胞被冻存在10%二甲基亚砜(DMSO)中防止结晶的形成,结晶的形成会损害细胞。然而,二甲基亚砜对细胞有毒*,快速的进行细胞复苏是很重要的。步骤:1、从液氮中取出一管细胞;2、将冻存管置于37℃水浴中2分钟(或放到管内溶液恰好完全溶解);3、将细胞转移到一15ml Falcon管中;4、加入5ml ES培养基(用培养基冲洗冻存管);5、离心3分钟;6、弃上清,用2ml ES培养基重悬细胞,至少吹打10次;7、种
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