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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
42
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
5mL*6支/盒
中文名称:0.1%吕氏碱性美蓝染色液
英文名称:见说明
产品规格:5mL*6支/盒
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ3995 | 5mL*6支/盒 | 1~3天 | 仅供科研实验 |
2、用镊子取一块盖玻片,将盖玻片一边与菌体接触,缓缓将盖玻片倾斜并覆盖在菌液上。
3、放置约3min后,先用低倍镜后用高倍镜(不用油镜)观察酵母的形态和出芽情况,并用颜色区别死活细胞。
4、染色0.5h后再次观察,注意死细胞是否增加。
结果观察:
酵母菌活细胞:无色;
酵母菌死细胞:蓝色或淡蓝色。
注意
1、用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹,以免破坏细胞。
2、滴加染液要适中,否则用盖玻片覆盖时,染液过多会溢出,过少会产生大量气泡。
3、盖玻片要缓慢倾斜覆盖,以免产生气泡。
培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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文献和实验染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。 三、菌种酿酒酵母的斜面培养物 染液:吕氏碱性美蓝染液 四、操作步骤 制备酵母菌的菌悬液——在载玻片中央滴加1滴吕氏——碱性美蓝染色液——滴加1滴酵母菌的菌悬液于染色液中——盖上盖玻片——放置3分钟——高倍镜下观察——30分钟后再观察 五
体积小,较透明,如未经染色常不易识别,而经着色后,与背景形成鲜明的对比,使易于在显微镜下进行观察。 三、器材 显微镜,酒精灯,载玻片,接种环,双层瓶,擦镜纸,生理盐水; 吕氏碱性美蓝染色液,石炭酸复红染色液; 金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌。 四、操作步骤 1.涂片 取两块干净的载玻片,各滴一小滴生理盐水于载玻片中央,用无菌操作(图Ⅳ-1,具体操作参照实验一),分别挑取金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌于二载玻片的水滴中
2.1 美蓝染色法 2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液 美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液 100mL 将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。 2.1.2 染色法 将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。 2.1.3 结果 菌体呈蓝色。
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