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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
buffer,powder,0.01mol/L,pH6.0
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
1L
英文名称:buffer,powder,0.01mol/L,pH6.0
产品规格:1L
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ4493 | 1L | 1~3天 | 仅供科研实验 |
柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L,pH6.0是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,考虑进行抗原修复。
产品组分
柠檬酸钠缓冲液干粉(0.01mol/L,pH6.0) 1L
说明书 1份
保存:2~8℃,避光,有效期一年。
按照每个片子需要10mL抗原修复液计算,1L抗原修复液可以用于100个样本的抗原修复。
本产品是干粉形式,使用前用去离子水或蒸馏水按产品规格溶解至1L,即可使用。
对于石蜡切片:
脱蜡:二甲苯3次,每次3~5min→无水乙醇2次,每次3~5min→ 95%乙醇1次,3~5min→ 90%乙醇1次,3~5min→ 75%乙醇1次,3~5min→蒸馏水洗2次,每次3~5min。
抗原修复:将切片浸泡在柠檬酸修复液中,95~100℃加热约15min(加热时间可以控制在10~20min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。
柠檬酸修复液使用前需预热到95~100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20~30min内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3~5min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5min。将切片浸泡在柠檬酸修复液中,95~100℃加热约15min(加热时间可以控制在10~20min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。柠檬酸修复液使用前需预热到95~100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20~30min内冷却至室温。用免疫染色洗涤液洗涤1~2次,每次3~5min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。
对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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柠檬酸钠缓冲液干粉(0.01mol/L,pH6.0)水平板计数琼脂培养基 Water Plate Count Agar 250g
标准I号营养琼脂 Standard I Nutrient Agar 250g
营养肉汤(NB) Nutrient Broth 250g
培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
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文献和实验乙酸和 0.07% β-巯基乙醇(2ME) (V/V ) 的丙酮(低温)。应在使用前新鲜配制,并置于 -20°C 条件下直到使用(见注释 1)。 注意:3 种试剂均有毒,必须在通风橱中配制。 2.2 清洗溶液 含 0.07% 2ME(V/V ) 的丙酮,可在 -20°C 下贮存约 1 个月。 2.3 R2D2 蛋白质溶解缓冲液 5 mol/L 尿素、2 mol/L 硫脲、2% 3- [ 3 - ( 胆酰胺丙基)二甲氨基 ] 丙磺酸内盐 ( CHAPS;m/V ) 、2%
、封片、镜检。 三、常用抗原修复方法 用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片:1、抗原热修复 可根据实验室的具体条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液,如 TBS、PBS、重金属盐溶液等,但实验证明,以 0.01M 枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的 ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液(粉剂)配制,取该粉剂一包溶于1000ml 的蒸馏水中,混匀,其 pH 值在 6.0 ± 0.1,如因蒸馏水本身造成的 pH 值偏差,请自行调整
,用醋酸调pH至6.5,加水至250ml,高压灭菌,或0.45μm膜过滤,室温保存。 (11)10% SDS:10g SDS(十二烷基硫酸钠)溶于50ml水中,加水至100ml,分装后室温保存。 (12)20×SSC:取NaCl 175.3g;柠檬酸钠88.2g;加水至1000ml,用10mol/l NaOH调pH至7.0;高压灭菌,室温保存。 (13)无菌水:100ml去离子水或双蒸水,分装,高压灭菌,室温保存,开瓶后仅限一周使用。 (14)10×激酶缓冲液:500mmol/L
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