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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
48
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
50mL|100mL
| 中文名称 | DMSO(细胞冻存) | 英文名称 | 见说明 |
| 产品规格 | 50mL|100mL | 发货周期 | 1~3天 |
| 货号 | LZ-PYJ4437 | 用途 | 仅供科研实验 |
DMSO(细胞冻存)是经典的细胞冻存液的成分之一,用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存,该溶液经无菌处理。
细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤,从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得1:10~1:20的稀释,稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜,这是因为当低温保护剂稀释10~20倍以后,该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。
随着实验室细胞培养的发展,除了原代培养之外,人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。冷冻保存细胞系的优点如下:
减少基因漂移;
减缓细胞系的衰老;
稳定表型;
减少微生物污染及交叉污染机会等。
产品组分
DMSO(细胞冻存) 50mL 100mL
说明书 1份
保存:室温,有效期1年。
细胞计数器
细胞冻存管
超低温冰箱或液氮
超净工作台
注意在超净工作台内无菌操作,尽量避免污染。
初次使用融化后可在4℃保存1个月,但应减少反复冻融的次数,以免失效。
杂交瘤细胞冻存时应定期复苏,检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
培养细胞至对数生长晚期,显微镜观察其外观、形态、有无污染等,取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞,用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化,进行细胞计数;如为悬浮生长细胞,进行细胞计数。
500~1000g离心5min,弃上清。
一般按培养基:DMSO(细胞冻存)=9:1或者血清:培养基:DMSO(细胞冻存)=1:8:1等比例配制细胞冻存液。重悬细胞,使细胞浓度达到1~10×106/ml,置于冻存管中,密
闭、不要拧的太紧,避免弯曲变形。
一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃ 20min,-20℃ 30min,-70℃过夜,最后置于液氮罐中长期存储。
简便 大多数无需高压灭菌即可使用
特异 目标菌落色泽鲜艳,易于辨识
可靠 经大量分离株验证,符合率高
快速 最快检测时间为24h
节省 大批量样本的处理和检测,可减少补充生化试验的时间和费用
标准化 显色培养基已经普遍得到FDA、AOAC等国外官方的认可,被逐步引入到各种国际和国家检验标准中
一、培养基颜色不正确
(1)含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
二、 培养基不凝固或凝固性差
(1)称量错误
(2)琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)加热过度
(5)琼脂量不足
三、培养基产生沉淀
(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
(2)灭菌前未充分溶解,如Fraser培养基中含有大量磷酸盐,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中的磷酸盐反应生成沉淀。
(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
(6)称量错误。
(7)试剂加入顺序不正确。
伤(Salmonella Typhi)标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒
通用型副伤A(Salmonella Paratyphi A)定性基因检测试剂盒
组织副伤A(Salmonella Paratyphi A)定性基因检测试剂盒
体液副伤A(Salmonella Paratyphi A)定性基因检测试剂盒
粪便副伤A(Salmonella Paratyphi A)定性基因检测试剂盒
LTE4 ELISA Kit
PA-IgG/M/A ELISA Kit
FE ELISA Kit
t-PA ELISA Kit
sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit
CDK4蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
CDK4蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
CDK4蛋白表达西方杂交分析试剂盒
细胞CDK4蛋白表达荧光定量检测试剂盒
细胞CDK4蛋白表达比色法定量检测试剂盒
Tranexamic acid
2-Aminonicotinic acid
6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone
3-Aminoquinoline
2-Amino-3-methylbenzoic acid
DMSO(细胞冻存)LB液体培养基/LB肉汤(干粉) LB Broth Medium 10×500mL|50×500mL|600×500mL|500g|12×500g|5kg
SOB液体培养基(干粉) SOB Medium 2袋/包(1 L/袋)|10袋/包(1 L/袋)
5×M9基础盐溶液(pH6.8,高压灭菌) 5×M9 Salt Solution(pH6.8) 500mL|500mL×10
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文献和实验原代细胞冻存技术:1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前一天换液一次。2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。3、1000rpm离心5分钟,弃上清液。4、沉淀加含DMSO的培养液,计数,调整至(1-10)×106 /ml。5、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。6、密封冻存管,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。7、用记号笔标明细胞种类,冻存日期。8、按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮。
工业级-DMSO用途: 主要用于无水有机化学合成反应和医药及中间体合成反应溶剂,使用该溶剂能提高化学反应速度,提高反应物的了收率,缩短反应时间,使合成反应变得更加顺利。 试剂级-DMSO用途: DMSO用作液体层析溶剂,同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物,存在于液体形态。 (责任编辑:大汉昆仑王)
在园子里经常看到询问冻存、复苏细胞的方法和注意事项。故介绍一些致命的 “败笔”,和解决方法。 希望对大家有帮助。 ( 以 Raji 为例) 一、细胞冻存: 1. 错误的时机: 细胞状态不好(长的太过了,培养液已经很黄;细胞可疑污染;细胞已 经开始凋亡或崩解;连续培养超过二个月,细胞性状已有改变改变)。 解决: 最佳时机:细胞增殖旺盛,情况稳定,试验效果良好,复苏后两周内。 2. 细胞太少: 冻存时细胞浓度低于 1-5×1000,000/ml。(复苏很难成功)。 解决: 离心后调整细胞
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