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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
48
- 英文名:
Non-enzy Cell Detach Solution
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
100mL
| 中文名称 | 无酶细胞消化液(含酚红) | 英文名称 | Non-enzy Cell Detach Solution |
| 产品规格 | 100mL | 发货周期 | 1~3天 |
| 货号 | LZ-PYJ4433 | 用途 | 仅供科研实验 |
本制品不含胰蛋白酶等蛋白消化酶类,但能有效地使贴壁细胞与培养瓶皿表面脱离而达到分离细胞目的。消化后的细胞可进行传代培养,亦可用于提取核蛋白和胞浆蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等实验,通常室温下10min左右就可以消化下大多数贴壁细胞,该消化液适用于消化肿瘤、脑、肝、肾、肺组织等,尤其适用于上皮组织。
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶经常用于动物组织的培养细胞消化或者一些组织的消化,但对细胞有的潜在损害,尤其是在37℃环境下危害较大。
作用温和;
对细胞的损伤和破坏小,不影响细胞生物学特性,是肿瘤细胞的好细胞脱壁方法;
可以在血清存在的情况下进行消化。
产品组分
无酶细胞消化液(含酚红) 100mL
说明书 1份
保存:室温,有效期1年。
PBS、培养液
显微镜
离心机
尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
在使用细胞消化液的过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
贴壁细胞的消化
吸除培养液,用无菌PBS、培养液洗涤细胞1次。
加入少量无酶细胞消化液(含酚红),略盖过细胞即可(一般按细胞的有效体积的10倍添加)。
室温放置10min,如置于37℃脱壁反应会加速,直到细胞完全脱壁,不同的细胞消化时间有所不同。亦可显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除消化液。
加入细胞培养液或5倍体积PBS缓冲液终止反应。如果发现消化不足,则加入无酶细胞消化液(含酚红)重新消化。
1000~2000g离心3~5min,沉淀细胞,弃上清,尽量去除无酶细胞消化液(含酚红),加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
组织的消化
PBS、培养液清洗组织1次,用无菌的刮勺或茶匙将剪碎的组织碎片转移至合适容器。
按组织有效体积的5~10倍,加入无酶细胞消化液(含酚红)。
置于37℃作用4~48h,无需振荡,不同的细胞消化时间有所不同。对于较难分解的肿瘤细胞,可作用5天或更长时间,但应重新用消化液悬浮。
吹打组织碎片数次,释放松散的细胞,轻轻晃动培养瓶或皿,倒置显微镜下检查分离情况,当细胞量少和/或在组织碎片中仍可见细胞时,需要继续消化。
1000~2000g离心3~5min,沉淀细胞,弃上清,尽量去除无酶细胞消化液(含酚红),加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
简便 大多数无需高压灭菌即可使用
特异 目标菌落色泽鲜艳,易于辨识
可靠 经大量分离株验证,符合率高
快速 最快检测时间为24h
节省 大批量样本的处理和检测,可减少补充生化试验的时间和费用
标准化 显色培养基已经普遍得到FDA、AOAC等国外官方的认可,被逐步引入到各种国际和国家检验标准中
一、培养基颜色不正确
(1)含有酸碱指示剂的培养基,若颜色不正确,通常是由于pH不正确导致的,加热过度、错误的灭菌方式等都会导致此项问题。
(2)加热过度导致某些成分分解或糖焦化,如SC培养基(SC增菌液)加热过度会变红,含糖量高的培养基,加热过度通常会出现颜色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分变质,如血液久置易变黑,制成的平板颜色偏棕黑色。
二、 培养基不凝固或凝固性差
(1)称量错误
(2)琼脂分布不均匀
(3)培养基pH不正确
(4)加热过度
(5)琼脂量不足
三、培养基产生沉淀
(1)某些培养基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培养基等,配方中含有大量不溶性碳酸钙。
(2)灭菌前未充分溶解,如Fraser培养基中含有大量磷酸盐,若灭菌前溶解不充足,灭菌后就会出现大量沉淀。
(3)pH不正确,偏酸或偏碱都有可能使培养基中的部分金属离子产生沉淀。
(4)水的纯度不够,天然水中含有较多的矿物盐离子,若未除净,则易与培养基中的磷酸盐反应生成沉淀。
(5)添加剂加入温度不正确,卵黄、血液等对温度敏感的添加成分,若加入时温度过高或温差过大,易出现凝块。
(6)称量错误。
(7)试剂加入顺序不正确。
通用型产气荚膜梭茵(Clostridium perfringens)基因检测试剂盒
通用型艰难梭菌(Clostridium difficile)基因检测试剂盒
通用型艾里塔拉军团菌(Legionella erythra)基因检测试剂盒
通用型嗜肺军团菌(Legionella pneumophilia)基因检测试剂盒
通用型大肠杆菌(Escherichia coli)基因检测试剂盒
GIP ELISA Kit
TECK/CCL25 ELISA Kit
sLR ELISA Kit
AT-Ⅲ ELISA Kit
APT ELISA Kit
细胞P16蛋白表达比色法定量检测试剂盒
石蜡切片组织P16蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
冻切片组织P16蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
载玻片细胞P16蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
石蜡切片组织P16蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒
DL-2-Amino-n-octanoic acid
2-Aminoquinoline
Amoxapine
6-Aminoquinoxaline
6-Aminoquinoline
无酶细胞消化液(含酚红)MSgg培养基(除菌) MSgg liquid Medium 500mL
De Greef & Jacobs培养基基盐(不含维生素) De Greef & Jacobs Base Salts 50L
DKW/胡桃培养基基盐(含维生素) DKW/Juglans Base Salts with vitamins 50L
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