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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
36
- 英文名:
Buffered glycerol-Sodium Chloride Solution
- 供应商:
上海联祖
- 规格:
250g
中文名称:缓冲甘油-氯化钠溶液
英文名称:Buffered glycerol-Sodium Chloride Solution
产品规格:250g
发货周期:1~3天
产品价格:询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ4083 | 250g | 1~3天 | 仅供科研实验 |
成分(g/L):
氯化钠 4.2
磷酸氢二钾 12.4
磷酸二氢钾 4.0
pH值7.2 25℃
用法:称取本品20.6g,另取100ml甘油,加热溶解于900ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。
注:配制双料缓冲甘油-氯化钠溶液(20%)时,用甘油200ml,和蒸馏水800ml。
培养基操作步骤:
一、用法:称取本品33.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。
二、配料:首先,根据培养基的配方,准确称量各种成分,包括粉状和非粉状的成分,如肉膏等,放入烧杯中。
三、溶化:向烧杯中加入适量的水,然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基,应注意防止外溢,并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH:在培养基溶解均匀并冷却至室温后,使用pH试纸测量pH值,然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤:使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤,以去除杂质。
六、分装:将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内,确保管(瓶)口塞上棉塞,以防止外界微生物污染。
七、灭菌:对分装好的培养基进行灭菌处理,通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定:灭菌后的培养基可以进行质量检定,以确保其符合使用要求。
培养基的计数方法:
一、稀释涂布平板法(亦称活菌计数法)是一种常用的微生物计数方法,其原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便,适用于菌体大小和质量都相近的类群,如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M,其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌,但可以估算出1mL培养中液中细胞个数,计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌,因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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文献和实验一、直接免疫荧光法(一)基本原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。(二)试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4 荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释 缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份
菌种活化:干粉标准菌株 标准贮备菌株 工作菌株; 1.1 金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌标准菌株: 挑取部分干粉溶解于0.9% 无菌氯化钠溶液中,划线接种于营养琼脂平板上,36℃±1℃ 培养18-24 小时。并观察菌落形态。 a. 金黄色葡萄球菌:菌落凸起,圆形,不透明; b. 大肠埃希氏菌:菌落稍凸,圆形,湿润,乳白色; c. 铜绿假单胞菌:菌落扁平,圆形,边缘不整齐,光滑湿润,可产生蓝绿或黄绿色素; d. 枯草芽孢杆菌: 表面粗糙不透明
一、直接法 1.标本经固定后,PBS洗涤3×3分钟。 2.加荧光素标记的抗体,湿盒内37℃孵育50分钟。 3.PBS洗涤3×3分钟。 4.0.1%伊文氏兰复染。 5.PBS洗3次,蒸馏水洗2次,每次3分钟,以除去NaCl结晶。 6.缓冲甘油封片,镜检。 二、间接法 1.标本固定后,PBS洗涤3×3分钟。 2.滴加一抗,37℃ 40分钟或4℃过夜。 3.PBS洗涤3×3分钟。 4.滴加荧光标记二抗37℃ 40
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