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- 库存:
大量
- 英文名:
0.1%吕氏碱性美蓝染色液
- 保质期:
3年
- 供应商:
上海联迈生物工程有限公司
- 保存条件:
常温、避光、防潮保存
- 规格:
5ml*6支/盒
| 名称 | 英文名称 | 编号 | 规格 | 价格 |
| 0.1%吕氏碱性美蓝染色液 | 0.1%吕氏碱性美蓝染色液 | LM8753 | 5ml*6支/盒 | 30元 |
| 产品说明及用途:.用于酵母菌镜检染色 | ||||
产品介绍:
1、组成:5ml×6
2、操作步骤:
2.1滴一小滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液于载玻片中央,按无菌操作取少量酵母
菌与其混合均匀。
2.2用镊子取一块盖玻片,将盖玻片一边与菌体接触,缓缓将盖玻片倾斜并覆盖
在菌液上。
2.3 放置约3min后,先用低倍镜后用高倍镜(不用油镜)观察酵母的形态和出芽
情况,并用颜色区别死活细胞。
2.4 染色0.5h后再次观察,注意死细胞是否增加。
3、结果观察:
酵母菌活细胞:无色;
酵母菌死细胞:蓝色或淡蓝色。
4、注意:
4.1 用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹,以免破坏细胞。
4.2 滴加染液要适中,否则用盖玻片覆盖时,染液过多会溢出,过少会产生大量
气泡。
4.3 盖玻片要缓慢倾斜覆盖,以免产生气泡。
使用脱水培养基和其他含有有害物质(胆盐或其它选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明配制。如质量/体积、pH、制备条件、灭菌条件和操作步骤等,并做好记录。
水
配制培养基使用蒸馏水或相同质量的水,以排除测试条件下抑制或影响微生物生长的物制。如果蒸馏水的用氯消毒的水制备的,在蒸馏前应先对氯进行中和(见GB/T6682)。盛放蒸馏水的容器最好是由中性材料制成的(如中性玻璃、聚乙烯等)。在初次使用前要确认容器中不含任何抑制因子。
0.1%吕氏碱性美蓝染色液为保证蒸馏水的质量,电阻率应至少达到300000Ωcm。
警告:采用离子交换器(去离子)生产的去离子水,微生物含量较高,这种水在过滤灭菌后仍可能带有细菌生长的抑制因子。所以配置培养基时最好不要使用这种方法生产的去离子水而应使用蒸馏水。
称量和复水
称量所需的脱水培养基(注意缓慢操作,必要时佩带口罩或在通风柜中操作,以防吸入含有毒物质的培养基粉末),0.1%吕氏碱性美蓝染色液先加入少量的水,充分混合(注意避免培养基结块),然后再加入至所需的量。
溶解
脱水培养基加水后适当加热,并不停搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热前应先浸泡几分钟。用各别成分制备的培养基应将不同成分分别加入适量的水中,并充分溶解,然后再加入到所需的量。
pH值的测定和调整
用pH计测pH,必要时进行调整。在实验室用各别成分制备培养基,除特殊说明外,培养基灭菌后冷却到25℃时,pH的变化不应超过0.2个单位。一般使用浓度约为40g/L(约1mol/L)的氢氧化钠溶液或浓度为36.5g/L(约1mol/L)的盐酸溶液调整培养基的pH。
0.1%吕氏碱性美蓝染色液注:商品化的培养基高压灭菌后pH值可能变化很大,但采用优质蒸馏水或去离子水配配制时,灭菌前无需调节pH值。
分装
将制配制好的培养基分装到适当的容器中,根据不同用途,容器的体积可为培养基的1倍、2倍或3倍。
灭菌
培养基和试剂应采用湿热灭菌或过滤灭菌。亮绿培养基等特定的培养基中含有对光和热敏感的物质,只能煮沸灭菌。煮沸后应迅速冷却,避光保存(参见相关标准或供应商使用说明)。
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文献和实验染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。 三、菌种酿酒酵母的斜面培养物 染液:吕氏碱性美蓝染液 四、操作步骤 制备酵母菌的菌悬液——在载玻片中央滴加1滴吕氏——碱性美蓝染色液——滴加1滴酵母菌的菌悬液于染色液中——盖上盖玻片——放置3分钟——高倍镜下观察——30分钟后再观察 五
四、操作步骤 制备酵母菌的菌悬液——在载玻片中央滴加1滴吕氏——碱性美蓝染色液——滴加1滴酵母菌的菌悬液于染色液中——盖上盖玻片——放置3分钟——高倍镜下观察——30分钟后再观察 五、实验报告: 绘图说明所观察的酵母菌的形态特征 六、预习 微 生物 大小的测定
体积小,较透明,如未经染色常不易识别,而经着色后,与背景形成鲜明的对比,使易于在显微镜下进行观察。 三、器材 显微镜,酒精灯,载玻片,接种环,双层瓶,擦镜纸,生理盐水; 吕氏碱性美蓝染色液,石炭酸复红染色液; 金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌。 四、操作步骤 1.涂片 取两块干净的载玻片,各滴一小滴生理盐水于载玻片中央,用无菌操作(图Ⅳ-1,具体操作参照实验一),分别挑取金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌于二载玻片的水滴中
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