结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)

中文名称：结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)
英文名称：Violet Red Bile Agar
产品规格：250g
发货周期：1～3天
产品价格：询价

货号	规格	发货期	用途
LZ-PYJ3682	250g	1～3天	仅供科研实验

用途：用于大肠菌群的固体平板检测。
成分(g/L)：
蛋白胨 7.0
酵母粉 3.0
氯化钠 5.0
乳糖 10.0
胆盐 1.5
结晶紫 0.002
中性红 0.03
琼脂 15.0
pH值7.4±0.1 25℃
用法：称取本品41.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸不要超过2分钟。取适宜稀释度样品液1ml，加入到无菌平皿中心，将冷至45±0.5℃的VRBA 10-15ml倾注于平皿中。小心旋转平皿将培养基与样液充分混匀。凝固后，再加3-4ml VRBA覆盖平板表层，翻转平板，置于36±1℃培养18-24小时。无需高压灭菌。临用时制备，不得超过3小时。
检验原理：
蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素、生长因子和辅酶等其他营养物质；氯化钠维持均衡的渗透；乳糖为可发酵碳水化合物，可作为一种能量来源；3号胆盐和结晶紫可抑制革兰氏阳性菌的生长；中性红为指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。
外观：
干粉培养基为淡红色粉末。
制备好的培养基为紫红色透明固态。
注意事项：
本品仅限于实验室使用。
干粉培养基出现过期、结块或变色，请勿使用。
保存条件和保质期：
干粉培养基在5-30℃下干燥避光保存，其保质期为三年。
制备好的培养基须在2-8℃干燥避光保存。
微生物灵敏度：
接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。


培养基的计数方法：
一、稀释涂布平板法（亦称活菌计数法）是一种常用的微生物计数方法，其原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便，适用于菌体大小和质量都相近的类群，如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌，但可以估算出1mL培养中液中细胞个数，计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌，因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。


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培养基操作步骤：
一、用法：称取本品33.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。
二、配料：首先，根据培养基的配方，准确称量各种成分，包括粉状和非粉状的成分，如肉膏等，放入烧杯中。
三、溶化：向烧杯中加入适量的水，然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基，应注意防止外溢，并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH：在培养基溶解均匀并冷却至室温后，使用pH试纸测量pH值，然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤：使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤，以去除杂质。
六、分装：将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内，确保管（瓶）口塞上棉塞，以防止外界微生物污染。
七、灭菌：对分装好的培养基进行灭菌处理，通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定：灭菌后的培养基可以进行质量检定，以确保其符合使用要求。