- ￥600 - 3200
- 联祖
- LZ-PYJ3442
- 国产
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 供应商：
上海联祖
- 规格：
500mL
英文名称：见说明
产品规格：500mL
发货周期：1～3天
产品价格：询价
| 货号 | 规格 | 发货期 | 用途 |
| LZ-PYJ3442 | 500mL | 1～3天 | 仅供科研实验 |
正常精液是一种混合物，在射精时由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子与前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，最终射出的混合物是一种粘稠的液体。精子分析的方法有很多，其中可通过培养进行检测。
产品组分
精子细胞BWW培养基储存液 500mL
说明书 1份
保存：4℃，有效期1年。
自备材料
无菌离心管
离心机
细胞培养箱
注意事项
注意无菌操作，尽量避免污染。
如无Earle培养液和增补的Earle培养液，可用精子细胞BWW培养基代替。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
取干净的精液样本室温放置30～60min，使之充分液化。
制备精子细胞(仅供参考，不是必须步骤)：
上泳法：取一个无菌的15mL锥底离心管，加入1mL液化的精液，在其上方轻轻加入Earle培养液1.2mL，45°倾斜试管，37℃孵育1h。轻轻竖立试管，取出最上层的1mL液体。加入8mL增补的Earle培养液稀释，500g离心5min，弃上清。加入Earle培养液0.5mL重新悬浮细胞，用于精子密度或功能的评估。
非连续密度梯度法：取一个无菌的15mL锥底离心管，加入3mL 80%的Percoll。轻轻加入3mL 40%的Percoll于80%的Percoll液面上，小心操作，不要打乱两种液体的界面。轻轻加入1～2mL精液于梯度溶液上，500g离心20min，弃上清。将管底的精子团重新悬浮于5～10mL的Earle培养液中，500g离心5min，弃上清。加入1mlEarle培养液，重新悬浮。
将含有精子细胞的离心管置于37℃含5%CO2、95%空气的细胞培养箱中孵育1h。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。
500g离心精子悬液5min，使精子细胞密度接近于10×106/ml，将精子重悬于0.5～1mL精子细胞BWW培养基（需要葡萄糖、酸钠、BSA等以及抗生素称为活能培养液）中，并在37℃含5% CO2、95%空气的细胞培养箱内孵育18-24h。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于37℃的普通培养箱内孵育。在孵育过程中，将试管20°倾斜。
培养基操作步骤：
一、用法：称取本品33.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。
二、配料：首先，根据培养基的配方，准确称量各种成分，包括粉状和非粉状的成分，如肉膏等，放入烧杯中。
三、溶化：向烧杯中加入适量的水，然后搅拌以溶解各成分。对于含有琼脂的培养基，应注意防止外溢，并在溶化过程中保持搅拌。
四、矫正pH：在培养基溶解均匀并冷却至室温后，使用pH试纸测量pH值，然后根据需要加入酸或碱来调整至合适的pH值。
五、澄清过滤：使用滤纸或多层纱布对培养基进行过滤，以去除杂质。
六、分装：将制备好的培养基分装入试管内或三角瓶内，确保管（瓶）口塞上棉塞，以防止外界微生物污染。
七、灭菌：对分装好的培养基进行灭菌处理，通常是通过高压灭菌来确保无菌环境。
八、检定：灭菌后的培养基可以进行质量检定，以确保其符合使用要求。
如何配置培养基：
1、配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。
2、调节pH值
用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。
3、过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。
4、分装
已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。
5、加棉塞
分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
6、制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。
培养基的计数方法：
一、稀释涂布平板法（亦称活菌计数法）是一种常用的微生物计数方法，其原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，可以推测出样品中大约含有多少活菌。这种方法操作简便，适用于菌体大小和质量都相近的类群，如细菌、酵母菌等的计数。计算公式为每克样品中的菌株数=C/V*M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
二、显微镜直接计数法利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量。这种方法不能区分死菌与活菌，但可以估算出1mL培养中液中细胞个数，计算公式为1mL 培养中液中细胞个数=小方格中细胞平均数×400 ×104×稀释倍数(个/mL)。显微镜直接计数法的缺点是不能区分死菌与活菌，因此计数到的细胞数包括了死亡的细胞数。
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Oenothein B
Pomolic acid
Macranthoin G
Emodin 6-O-β-D-glucoside
Denthyrsinin
精子细胞BWW培养基储存液庆大霉素(100IU)和亚碲酸钾(1mg)混合液 1mL*5支/盒
氯化钠营养琼脂 NaCl Nutrient Agar 250g
副溶血性弧菌成套生化鉴定管(HRGB) 10种*2套/盒*5盒
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文献和实验再创生命奇迹！日本科学家用干细胞培育出原始生殖细胞，并产生健康可育的大鼠后代
），这些 PGCLCs 被移植到无生殖细胞大鼠的输精管时，产生了有功能的精子细胞，进而产生健康的后代。 图片来源：Science 在哺乳动物中，原始生殖细胞（PGCs），是精子和卵子的前体，产生于前肠胚。前期的研究使用转基因小鼠等工具已经揭示了对 PGCs 命运决定至关重要的关键信号通路和转录调节因子。然而，早期胚胎发育中数量较少的 PGCs 限制了领域内对其进入特化生殖细胞的特定时间窗口的认识。 主要研究内容 在胚胎着床后，大鼠的胚泡会形成一个卵柱结构，包含一个多能的外胚层，而生殖细胞即由此产生
，先将 CFSE 染色和不染色的细胞 2 倍稀释，每孔 100 μl 细胞铺板。将 ConA 储存液进行 100 倍稀释，在 ConA 组中每孔加入 100 μl 配置好的 ConA 工作液，使得终浓度为 5 μg/ml（这时就是 200 倍稀释啦），在 PBS 组中加入 100 μl 完全培养基（这样铺板密度就为 5×105/ 孔）。将细胞培养板置于 37 ℃，5% CO2 的培养箱中培养 72 小时。4. 流式上机检测收集各组细胞，染色组细胞进行 CD3 表面染色，以对脾细胞中的淋巴细胞的增殖
2-8 μg 为佳）加入240 μL HBS中，混匀。另一管中则用HBS 将100 μM 的PEI 储存液稀释成10 μM，充分混合。然后取180 μL 10 μM PEI 溶液加入含有DNA 的HBS 中，充分混匀后室温静置20-30 min。最后将这420 μL 的PEI-DNA 混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％ CO2 的37℃ 温箱孵育。 注：每次用100 μM 的PEI 储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。 3. 培养6-10 h
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