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YXSW
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浙江羽翔生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验再创生命奇迹!日本科学家用干细胞培育出原始生殖细胞,并产生健康可育的大鼠后代
),这些 PGCLCs 被移植到无生殖细胞大鼠的输精管时,产生了有功能的精子细胞,进而产生健康的后代。 图片来源:Science 在哺乳动物中,原始生殖细胞(PGCs),是精子和卵子的前体,产生于前肠胚。前期的研究使用转基因小鼠等工具已经揭示了对 PGCs 命运决定至关重要的关键信号通路和转录调节因子。然而,早期胚胎发育中数量较少的 PGCs 限制了领域内对其进入特化生殖细胞的特定时间窗口的认识。 主要研究内容 在胚胎着床后,大鼠的胚泡会形成一个卵柱结构,包含一个多能的外胚层,而生殖细胞即由此产生
,先将 CFSE 染色和不染色的细胞 2 倍稀释,每孔 100 μl 细胞铺板。将 ConA 储存液进行 100 倍稀释,在 ConA 组中每孔加入 100 μl 配置好的 ConA 工作液,使得终浓度为 5 μg/ml(这时就是 200 倍稀释啦),在 PBS 组中加入 100 μl 完全培养基(这样铺板密度就为 5×105/ 孔)。将细胞培养板置于 37 ℃,5% CO2 的培养箱中培养 72 小时。4. 流式上机检测收集各组细胞,染色组细胞进行 CD3 表面染色,以对脾细胞中的淋巴细胞的增殖
2-8 μg 为佳)加入240 μL HBS中,混匀。另一管中则用HBS 将100 μM 的PEI 储存液稀释成10 μM,充分混合。然后取180 μL 10 μM PEI 溶液加入含有DNA 的HBS 中,充分混匀后室温静置20-30 min。最后将这420 μL 的PEI-DNA 混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中,轻轻摇动平皿混匀,置于含5%~7% CO2 的37℃ 温箱孵育。 注:每次用100 μM 的PEI 储存液前都需要先将其充分混匀,保证所取的浓度一致。 3. 培养6-10 h
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