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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名:
EasyQuick RT MasterMix
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
E665905-200T
本产品是快速逆转录试剂混合液,5×EasyQuick RT MasterMix中包含EasyQuick RT逆转酶、RNase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、EQ-RT Buffer 等从RNA模板逆转录成cDNA第一链所需的全部试剂。该产品的逆转录效率高,可对少 量RNA模板进行良好的逆转录反应,15分钟即可完成荧光定量模板cDNA第一链合成。 本试剂盒操作十分方便快捷,仅需加入RNA模板和水即可进行逆转录反应,特别适合 于高通量检测。
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产品特点
1.简便:即用型逆转录Mix,只需加入RNA模板和水,便可进行反应。
2.快速:15分钟完成cDNA第一链合成。
3.反转录效率高:反转录效率高于90%。
4.灵敏度高:pg级模板也可以得到高质量的cDNA。
5.通读复杂模板:GC含量高和二级结构复杂模板。
注意事项
1.在操作过程中应避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染,建议操作人 员带口罩和一次性手套并经常更换手套,使用专门的仪器和耗材。
2.逆转录体系配制在冰上进行操作,防止RNA发生降解。试剂盒的MasterMix使用后 尽快置于-20℃保存,并尽量避免反复冻融。
3.10 μl反应体系可最大使用1 μg总RNA,如果模板RNA的量大于1 μg,请按比例扩大 反应体系。
4.对于二级结构复杂的RNA模板,建议在操作步骤之前,将模板RNA在65℃孵育5 min 立刻置于冰上,短暂离心后进行下一步操作。
操作步骤
1.将模板RNA在冰上解冻;将试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上,使用前将每种 溶液涡旋振荡混匀,并经短暂离心后使用。
2.根据以下表格配制反应体系(反应液配制请在冰上进行),涡旋震荡混匀,短暂离心, 使管壁上的溶液收集到管底。
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注意:
1) 如果总RNA量大于1 µg,请按比例扩大反应体系。
2)5×EasyQuick RT MasterMix 中含有Oligo(dT)、Random primer、RNase Inhibitor、dNTP Mixture、EQ-RT Buffer等。
3.37℃孵育15分钟。
4.85℃孵育5秒钟,使逆转录酶失活。
5.短暂离心后置于冰上,再进行后续实验,如果需要长时间保存,请置于-20℃。
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文献和实验Reverse Ligation Mediated RT -
the 2-4µl of supernatant so collected. Resuspend the precipitates in 4µl H 2 O. Store on ice until ready to proceed. Make RT mastermix 1 with the following components and with this volume per reaction 0.9µl H 2 O
Reverse Ligation Mediated RT - PCR
. Brief second spin, pulse to full speed then release, discard the 2-4µl of supernatant so collected. Resuspend the precipitates in 4µl H2 O. Store on ice until ready to proceed. Make RT mastermix 1 with the following components
程序。所有的逆转录反应均采用0.5μg 的Oligo(dT)20 引物为引物。 设置第一步RT 反应 成分 以Oligo(dT)20 为引物进行逆转录 反应成分的终浓度 不含RNA 酶的水 加至MasterMix 1 总体积为10μl dNTP 混合物每种dNTP 浓度均为10 mM
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










