- ￥222.90
- 阿拉丁
- 上海
- E665597
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20°C储存;避免反复冻融
- 英文名：
Es Taq DNA Polymerase
- 库存：
期货
- 供应商：
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格：
E665597-500U
Es Taq DNA Polymerase是Taq与Pfu DNA Polymerase的优化混合酶，具有5′→3′DNA聚合酶活性、5′→3′ 外切酶和3′→5′ 外切酶活性。与Taq DNA Polymerase相比，Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能，能高效率扩增DNA片段。使用本品扩增得到的大部分PCR产物3′ 端附有一个“A”碱基，可直接用于T/A克隆。本产品适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等反应。
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活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧 核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量控制：
经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性； PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一 个月，无明显活性改变。
使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实 际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1. PCR反应体系
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注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高 引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2. PCR反应条件
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注意：
1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降 低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Es Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太
多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
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文献和实验product is obtained. 5.Taq DNA Polymerase. Usually 1-1.5u of Taq DNA Polymerase are used in 50µl of reaction mix. Higher Taq DNA Polymerase concentrations may cause synthesis of nonspecific products. However, if inhibitors are present in the reaction
High Specificity PCR Amplification Using AccuPrime Taq DNA Polymerase
1–200 ng AccuPrime™ Taq DNA Polymerase 0.25 µl 0.5 µl 1 µl Autoclaved distilled water
Cloning of Taq polymerase-amplified PCR products
2) Check the PCR product by agarose gel electrophoresis. You should see a single, discrete band. If you do not see a single band, refer to the Note below. 2. Optional Protocol with Platinum® Taq DNA Polymerase High
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