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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8°C储存
- 英文名:
Neomycin solution
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
N485930-20ml
化学结构:氨基糖苷类
应用
新霉素溶液可用于:作为骨髓移植用高压灭菌酸化水的补充剂筛选稳定的克隆作为人工海水(ASWO)培养基的组分,以从O. tauri培养物中去除细菌
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文献和实验可以用于任何DNA导入哺乳类动物进行暂时性表达或长期转化的研究。该方法往往被用于贴壁细胞的转染,也是最好的方法。 1. 试剂的配制 (1)2×HBS 1.63 g NaCl ;1.19g Hepes;0.023 g Na2 PO4 ·2H2 O;加水至100 ml pH 7.1 过滤,4℃保存 (2)2mmol/L CaCl2 过滤除菌 (3)TE:0.1mmol/L EDTA,1mmol/L Tris-HCL PH 8.0 (4)G418(新霉素G418)液:1g G418溶于
液。不可在压力较高时打开放气阀,引起减压沸腾,使容器中液体溢出。培养液组成中如含有遇热易分解的物质,则需用过滤方法消毒灭菌。首先对培养液中耐热组分进行高压蒸汽灭菌后放置在无菌场所,固体培养液在40 ºC左右琼脂即将凝结前,加入经过过滤除菌的不耐热溶液,混匀后冷却备用。液体培养液在冷却到室温后再加入过滤除菌溶液。过滤除菌时,使用孔径为0.22~0.45 μm或更小的细菌滤膜。过滤除菌可利用抽滤装置或注射过滤器进行,所用器皿均应进行高压消毒灭菌,温度不应超过121 ºC。3.玻璃器皿、塑料器皿和器械
裂解 1)将细菌沉淀,所得重悬于350μlSTET中。 STET 0.1mol/L NaCL 10mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 1mmol/L?EDTA(pH8.0) 5% Triton X-100 2)加25μl新配制的溶菌酶溶液[10mg/ml,用10mmol/L Tris.Cl(pH8.0)配制],振荡3秒钟以混匀之。如果溶淮中pH低于8.0,溶菌酶就不能有效发挥作用。 3)将离心管放入煮沸的水浴中,时间恰为40秒。 4)用微量离心机于室温以12 000g离心10分种。 5)用无菌牙签从微
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