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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存
- 英文名:
15(S)-HETE-biotin
- 库存:
期货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
1217461-45-4
- 规格:
H379634-50μg/H379634-25μg
| 规格: | H379634-50μg | 产品价格: | ¥5969.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | H379634-25μg | 产品价格: | ¥3149.9 |
英文名:15(S)-HETE-biotin
纯度或规格:Moligand™, ≥95%, 含微量游离生物素,100μg/ml in ethanol
SPU:H379634
CAS:1217461-45-4
存储温度:-20°C储存
运输条件:超低温运输
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文献和实验4~6个月。②仲丁醇或正丁醇。③TE缓冲液100 mmol/L Tris·Cl(pH 9.0)1 mmol/L EDTA。④无水乙醇、70%乙醇。⑤3 mol/L醋酸钠(pH5.2)。⑥0.1 mmol/L EDTA(pH8.0)或灭菌dH2O。 2.方法 (1)强光源照射标记:在暗室安全灯下,向微量离心管中加入15μg待标记核酸(DNA或RNA),15μg光敏生物素并混匀。将反应管敞口插入冰模中,液面距光源10cm,用LYQ 12-100卤钨灯光照标记30min。加入70μlTE缓冲
~1:300。孵育于37℃45min,加1.25ml PBS Tween,室温静置10min,离心,倾去上清液。 (6)生物素标记探针的荧光显示:加200μl 4×SSC含0.1%Trion X-100 和5%BSA。室温静置10min后,加20μl抗生物素标记FITC抗血清15μg/ml,孵育在37℃30min,以1.5ml 4×SSc 0.1% Trion X-100洗1次,加入1.25ml IBm Triton X-100,室温静置10~15min,间歇振荡、离心。
涂片,用95%乙醇、5%乙醇固定5min,PBS冲去固定液,加含探针的杂交液覆盖(光敏生物素标记探针浓度为2.5ng/μl),在温盒中50℃孵育1~2h,取出后直接加入胶体金标记链亲合素(1mg/ml)室温孵育15min,然后在室温或37℃下用大容量(200ml/每片)洗脱液(2×SSC,0.1%Triton X-100)分别冲洗5~10min,以银显影液放大金颗粒显示原位杂交结果,可用1%伊红复染,脱水,透明,封片,镜检。 如为冰冻切片(cryostat section 10~15μm),应
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