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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Water, DEPC-treated, Sterilized
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现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- CAS号:
7732-18-5
- 规格:
W293452-500ml
英文名:Water, DEPC-treated, Sterilized
纯度或规格:无菌
SPU:W293452
CAS:7732-18-5
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运输条件:常规运输
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文献和实验用于Northern杂交、斑点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。【试剂盒之外所需准备试剂】氯仿、异丙醇、75% 乙醇( D E P C 处理水配制) 、RNase-free水(制备方法:使用RNase-free的玻璃瓶,向超纯水中加DEPC至终浓度0.01%(v/v),过夜搅拌后,高温高压灭菌。)保存和运输1. RNAiso Reagent在室温下可以保存12个月,为保证试剂质量,建议于2-8℃下避光保存。2. 可以在常温下运输。RNA
(一)细胞总RNA的提取1、6孔板细胞汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5 min。2、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15 s。3、室温静置2-3 min后,12000 rpm,15 min,4 ℃,离心。然后取上清无色水相(约0.6 ml)到 EP管(DEPC处理过),加0.5 ml新开的异丙醇,室温下静置10 min。4、12000
度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂(Gibco公司) 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5分钟(观察:液体变粘稠,细胞脱壁)。2)、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15秒。3)、室温静置2-3分钟后,12000 rpm,15 min,4℃,离心。然后取上清无色水相(约0.6 ml)到 EP管(DEPC处理过),加0.5 ml新开的异丙醇,室温下静置10分钟。4)、12000 rpm
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