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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Recombinant Mouse PKM1 Protein (His Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
50 µg
蛋白名称:Mouse PKM1 Protein (His Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the Mouse PKM (NP_001240812.1) (Pro2-Pro531) was expressed with a polyhistidine tag at the N-terminus.
表达宿主:Baculovirus-Insect Cells
蛋白纯度:≥ 90 % as determined by SDS-PAGE.
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Met
蛋白分子量:The recombinant Mouse PKM consists of 549 amino acids and predicts a molecular mass of 60.25 KDa. It migrates as an approximately 59 KDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:NP_001240812.1
蛋白氨基酸序列:Pro2-Pro531
蛋白标签:N-His
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文献和实验动物和昆虫细胞表达系统,尤其是分泌蛋白的纯化中,His-tag系统则有局限。因为酵母和昆虫细胞的培养基pH通常为酸性,会干扰His-标签蛋白与IMAC纯化树脂的结合。而酵母和哺乳动物细胞培养基,则通常含有氨基酸会竞争His-标签的结合位点,如组氨酸,谷氨酰胺或精氨酸。 Strep-tag®系统对各宿主表达系统的适用情况较为理想。根据其纯化原理,酸性pH和有力的氨基酸不会影响Strep-标签蛋白与纯化树脂的结合(前文也曾提到,此系统的耐受pH范围为4-10)。而哺乳动物细胞培养基中存在的生物素需要注意
Protein表达是一个非常复杂的过程,因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件,在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因: 纯化全长的蛋白 获得最高纯化的蛋白 适合变性或生理条件下纯化 优化的操作过程,可以直接从培养基中纯化蛋白 与Strep-tag®配合最有效的是6xHistidine-tag,总之推荐一个Tag在蛋白的N-端,另外一个Tag在蛋白的C-端。 纯化
Double-tag在蛋白纯化过程中的应用 Protein表达是一个非常复杂的过程,因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件,在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因: 纯化全长的蛋白 获得最高
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