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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
28
- 抗体英文名:
Normal Rabbit IgG/Gold
- 抗体名:
胶体金标记的正常兔IgG
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
0.4 mg/ml
- 规格:
500ul
| 产品名称 | 胶体金标记的正常兔IgG | 货号 | A-01K99387 |
| 英文名称 | Normal Rabbit IgG/Gold | 浓度 | 0.4 mg/ml |
| 规格 | 500ul | 用途 | 仅供科研实验 |
别名:Rabbit Immunoglobulin G/Gold 胶体金标记的正常兔IgG
性状:Liquid
浓度:0.4 mg/ml
保存条件:Store at 2-8℃ for 3-6 months. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:Immunoglobulin G (IgG), is one of the most abundant proteins in serum with normal levels between 8-17 mg/mL in adult blood. IgG is important for our defence against microorganisms and the molecules are produced by B lymphocytes as a part of our adaptive immune response. The IgG molecule has two separate functions; to bind to the pathogen that elicited the response and to recruit other cells and molecules to destroy the antigen. The variability of the IgG pool is generated by somatic recombination and the number of specificities in an individual at a given time point is estimated to be 1011 variants.可选粒径(5nm 10nm 15nm 35nm)等,如需其他粒径可定制
二抗的4个基本步骤:
1. 选择正确的种属来源和反应物种
二抗的选择首要基于一抗,应与一抗的种属来源相对应,且需要来自于不同的物种(如下图所示)。
2. 选择正确的二抗形式
选择合适且正确的二抗形式,也是获得实验成功的关键之一。三种二抗形式Whole IgG、F(ab') 、Fab如下图所示。
3. 抗体特异性的选择
要注意区分二抗的特异性和形式的不同,特异性指的是二抗识别的不同一抗亚型或某特殊区域。抗体的特异性主要基于以下三种形式:
(1)轻链特异性
(2)Fc端特异性
(3)亚型特异性
4.偶联标记的选择
不同实验类型适合的标记类型不一样,如下表所示:
免疫荧光双标抗体选择注意事项:
双重免疫荧光
在同一组织或细胞标本同时检测两种抗原时,需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法也分为直接法和间接法。
直接法双重免疫荧光标记
直接法双重免疫荧光标记:将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种抗原进行定位和定量。直接法简便可靠,但灵敏度较低。
间接法双重免疫荧光标记
间接法双重免疫荧光标记:用未标记的两种特异性一抗(不同种属来源)孵育组织或细胞,洗去多余的一抗后,再用两种不同的荧光素分别标记的二抗孵育组织或细胞,洗去多余的二抗体,后在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,从而对两种抗原进行定位和定量。
公司正在出售的产品:
| 磷酸化乳腺癌易感基因1抗体 | Anti-Lactoperoxidase/RBITC |
| RRAD封闭多肽 | Anti-COPS2/RBITC |
| 电压开启的钠离子通道SCN9A封闭多肽 | Anti-Thioredoxin/RBITC |
| 重组人白介素15 (活性的, Tag free) | Anti-DAAM2/RBITC |
| 核糖体蛋白4Y2封闭多肽 | Anti-KIAA1543/RBITC |
| 钾离子通道Kir2.2封闭多肽 | Anti-RGMC/Repulsive Guidance Molecule C/RBITC |
| IQCD蛋白封闭多肽 | Anti-phospho-CD19 (Ser227)/RBITC |
| 锌指蛋白RIZ1封闭多肽 | Hippocalcin Antibody Blocking Peptide |
| 转运蛋白3封闭多肽 | Anti-GRO Alpha/RBITC |
| 肝肠钙粘连蛋白封闭多肽 | Anti-EVC2/RBITC |
| 重组病毒A35R蛋白 | Anti-Neurokinin 1 Receptor/RBITC |
| X染色体开放阅读框57封闭多肽 | Anti-GRIK3/RBITC |
| 锌指蛋白829封闭多肽 | 胶体金标记的正常兔IgGAnti-MC4 Receptor/RBITC |
| 细胞色素P450ⅡE1封闭多肽 | Anti-phospho-MEK1 (Ser385)/RBITC |
| 嗅介蛋白样蛋白2B封闭多肽 | Anti-phospho-APG4B (Ser34)/RBITC |
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文献和实验胶体金标记蛋白质的原理,一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时,蛋白质呈电中性,此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小,但蛋白质分子的表面张力却最大,处于一种微弱的水化状态,较易吸附于金颗粒的表面。由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带正电荷,胶体金带负电荷,二者极易静电结合形成大的聚合物。如果pH高于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,与金颗粒的负电荷相互排斥而不能互相
胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域。用胶体金作为特殊标记物的研究始于60年代初,1962年Feldberr等报道了用胶体金标记细胞进行电子显微镜的研究。1971年,Taylor
当蛋白质的最适稳定量及标记的最佳pH值被确定以后,便可进行标记。具体步骤如下。(1)根据标记所用胶体金的总量计算出所需要待标记蛋白质的总量。(2)边搅拌边将蛋白质溶液加入胶体金溶液中,逐渐加入,lmg的蛋白质量大约需5min,或在搅拌下将胶体金逐渐加入到蛋白质溶液中,大约需5~10min。(3)继续搅拌10min,然后加入5%BSA使其终浓度为1%,或加入3%聚乙二醇(PEG,Mr:20000)使其终浓度为0.05%,其效果BSA要优于PEG。(4)将标记好的胶体金装入透析袋中,两头扎紧,放
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