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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
33
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Rabbit
- 抗体英文名:
Rabbit Anti-Biotin/Bio
- 抗体名:
生物素标记的兔抗生物素抗体IgG
- 免疫原:
KLH conjugated Biotin
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
WB=1:1000-10000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-1000, IF=1:100-1000, ELISA=1:1000-10000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
2.0 mg/ml
- 规格:
100ul
英文名称:Rabbit Anti-Biotin/Bio
中文名称:生物素标记的兔抗生物素抗体IgG
别名:Rabbit Anti-Biotin IgG(Biotin)
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应: Mink
产品应用:WB=1:1000-10000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-1000, IF=1:100-1000, ELISA=1:1000-10000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
性状:Liquid
浓度:2.0 mg/ml
免疫原:KLH conjugated Biotin
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
缓冲液:10 mM TBS (pH=7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% glycerol.
保存条件:Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:
| Biotin is a water soluble vitamin, generally classified as a B complex vitamin, also called vitamin B4. After the initial discovery of biotin, nearly forty years of research were required to establish it as a vitamin. Biotin is required by all organisms but can only be synthesized by bacteria, yeasts, molds, algae, and some plant species. Biotin is required as prosthetic group of enzymes involved in incorporation of carbon dioxide into organic compounds. Biotin has a MW of 244 Da. |
第一抗体
第一抗体就是能和非抗体性抗原(特异性抗原)特异性结合的蛋白。种类包括单克隆抗体和多克隆抗体。
第二抗体
第二抗体是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。用抗AIV H5亚型血凝素单克隆抗体为包被抗体,兔抗AIV IgG为第二抗体。第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗)。
一抗:可以特异结合底物,就是识别出我们想要检测的东西。一抗和底物结合与否用肉眼是看不出来的。二抗:可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),作用是检测一抗。 如果一抗自己带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),则不需要二抗。但这样成本很高,因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗。而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。
注意事项:
1、一抗种属不同,最好都是单抗,二抗匹配对应的一抗,二抗不同荧光标记。如果可以,二抗最好来自同一宿主物种。
2、一抗是单克隆抗体时:二抗应针对一抗的类或亚类。例如,mouse IgM一抗需要抗mouse IgM二抗。当使用多个亚类特异性一抗时,应使用亚类特异性二抗来区分一抗。例如,使用IgG2和IgG1一抗的免疫荧光双标实验使用抗IgG2和抗IgG1二抗更优。
3、一抗是多克隆抗体时:可以使用IgG二抗,因为大多数多克隆抗体是IgG类免疫球蛋白。
4、为了限制二抗与近缘种的一抗非特异性结合,使用对近缘种预吸附的二抗。例如,抗mouse二抗可能与rat一抗发生交叉反应。使用rat血清吸附的抗mouse二抗可减少交叉反应性。注:谨慎选择对近亲属物种(如rat和mouse)预先吸附的二抗,吸附可消除高亲和力抗体,导致信号减弱。
5、封闭液的选择:封闭液作用就是尽量封闭掉能与二抗结合产生非特异性染色的抗原。所以,封闭液尽量选择与二抗种属同源的血清封闭液。比如,二抗是“donkey抗goat AF488、donkey抗rabbit AF594”,那么最佳封闭液就是donkey血清封闭液。免疫荧光双标实验中二抗种属来源于非mouse、非rabbit、非goat,而是选择donkey、马、鸡等种属来源,并且二抗采用一样的种属来源,这样可以一种来源的血清完成两个抗体的封闭。
6、两种一抗同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要自我摸索,一抗4℃孵育过夜比较好。
7、荧光染色后一般在1h内完成观察,或于4℃保存4h,时间过长,可能会使荧光提前衰退。
下列是公司正在出售的产品:
| 酶1抗体 | MAG Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 | ANO9 Antibody Blocking Peptide |
| 4号染色体开放阅读款 | OVA / AF647 |
| 细胞色素P450 2B1抗体 | NIPA2 Antibody Blocking Peptide |
| 乙醛酸还原酶抗体 | FOXN4 Antibody Blocking Peptide |
| 甲基样蛋白16抗体 | Recombinant human ST2 protein, His (HEK293) |
| 跨膜蛋白132A抗体 | Phospho-Rad17 (Ser645) Antibody Blocking Peptide |
| X染色体开放阅读框20抗体 | MEF2 Antibody Blocking Peptide |
| KB抑制蛋白激酶Ζ抗体 | MARCH3 Antibody Blocking Peptide |
| 胰岛素生长因子样家族成员2抗体 | LYSMD4 Antibody Blocking Peptide |
| 糖原蛋白1 | MAP3K15 Antibody Blocking Peptide |
| 芳基硫酸酯酶B抗体 | SLCO2A1 Antibody Blocking Peptide |
| 胰凝乳蛋白酶B抗体 | 生物素标记的兔抗生物素抗体IgGphospho-PAK2 (Ser141) Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化异质核糖核蛋白K抗体 | HEATR4 Antibody Blocking Peptide |
| 滤泡树突细胞分泌蛋白抗体 | FEM1A Antibody Blocking Peptide |
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文献和实验,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用。 8. 在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
结合(详见参考文献1); 7. 交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用; 8. 在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
或亲合素。所以卵白素―生物素免疫染色系统又称为抗生物素―生物素免疫染色法。 二、几中抗生物素―生物素染色法 1.抗生物素―生物素―过氧化酶复合物技术(Avidin Biotin �Peroxidase Complex technique, 简称ABC技术) (1)基本原理:ABC法是Hsu 等于1981年在HRAB法和LAB法的基础上改良的,其特点是利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。与LAB法和BRAB法不同的是第一抗体不为标记物所标记,生物素标记
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