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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
45
- 克隆性:
多克隆
- 抗原来源:
Rabbit
- 抗体英文名:
Rabbit Anti-Biotin/FITC
- 抗体名:
FITC标记的兔抗生物素抗体IgG
- 免疫原:
KLH conjugated Biotin
- 亚型:
IgG
- 应用范围:
IF=1:100-1000, Flow-Cyt=1:100-1000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
- 保存条件:
Store at -20℃
- 浓度:
2.0 mg/ml
- 规格:
100ul
双重免疫荧光
在同一组织或细胞标本同时检测两种抗原时,需进行双重荧光染色。双重免疫荧光标记法也分为直接法和间接法。
直接法双重免疫荧光标记
直接法双重免疫荧光标记:将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种抗原进行定位和定量。直接法简便可靠,但灵敏度较低。
间接法双重免疫荧光标记
间接法双重免疫荧光标记:用未标记的两种特异性一抗(不同种属来源)孵育组织或细胞,洗去多余的一抗后,再用两种不同的荧光素分别标记的二抗孵育组织或细胞,洗去多余的二抗体,后在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,从而对两种抗原进行定位和定量。
商品属性:
| 产品名称 | FITC标记的兔抗生物素抗体IgG | 货号 | A-01K96494 |
| 英文名称 | Rabbit Anti-Biotin/FITC | 免 疫 原 | KLH conjugated Biotin |
| 规格 | 100ul | 用途 | 仅供科研实验 |
别名:Rabbit Anti-Biotin IgG(FITC)
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应: Mink
产品应用:IF=1:100-1000, Flow-Cyt=1:100-1000
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
性状:Liquid
浓度:2.0 mg/ml
免疫原:KLH conjugated Biotin
亚型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
缓冲液:10 mM TBS (pH=7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% glycerol.
保存条件:Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
产品介绍:Biotin is a water soluble vitamin, generally classified as a B complex vitamin, also called vitamin B4. After the initial discovery of biotin, nearly forty years of research were required to establish it as a vitamin. Biotin is required by all organisms but can only be synthesized by bacteria, yeasts, molds, algae, and some plant species. Biotin is required as prosthetic group of enzymes involved in incorporation of carbon dioxide into organic compounds. Biotin has a MW of 244 Da.
二抗的4个基本步骤:
1. 选择正确的种属来源和反应物种
二抗的选择首要基于一抗,应与一抗的种属来源相对应,且需要来自于不同的物种(如下图所示)。
2. 选择正确的二抗形式
选择合适且正确的二抗形式,也是获得实验成功的关键之一。三种二抗形式Whole IgG、F(ab') 、Fab如下图所示。
3. 抗体特异性的选择
要注意区分二抗的特异性和形式的不同,特异性指的是二抗识别的不同一抗亚型或某特殊区域。抗体的特异性主要基于以下三种形式:
(1)轻链特异性
(2)Fc端特异性
(3)亚型特异性
4.偶联标记的选择
不同实验类型适合的标记类型不一样,如下表所示:
公司正在出售的产品:
| 紫外切除修复蛋白RAD23B抗体 | GABARAPL1 Antibody Blocking Peptide |
| 12号染色体开放阅读框61抗体 | Phospho-p63 (Ser455) Antibody Blocking Peptide |
| 肾功能相关抗原1抗体 | Vitamin D Receptor/VDR Antibody Blocking Peptide |
| 胸苷激酶2抗体 | HSD17B2 Antibody Blocking Peptide |
| 线粒体型共济失调蛋白抗体 | TRPM3 Antibody Blocking Peptide |
| 膜相关环指蛋白8抗体 | EDARADD Antibody Blocking Peptide |
| 绒毛膜癌不表达蛋白1抗体 | phospho-MBP (Tyr203) Antibody Blocking Peptide |
| 转录调节因子MAZR抗体 | DTYMK Antibody Blocking Peptide |
| KB抑制蛋白激酶α/β抗体 | ANKRD37 Antibody Blocking Peptide |
| 链酶亲和素抗体 | KIF20A/MKLP2 Antibody Blocking Peptide |
| 肝细胞生长因子受体抗体 | TNFRSF17 Antibody Blocking Peptide |
| 磷酸化微管相关蛋白抗体 | PNP Antibody Blocking Peptide |
| 钠离子通道β1抗体 | FITC标记的兔抗生物素抗体IgGHMGCS2 Antibody Blocking Peptide |
| 丝裂原活化蛋白激酶1/2单克隆抗体 | Nano-Tag15 Peptide |
| 嗅觉受体5D16抗体 | PPIL3 Antibody Blocking Peptide |
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
ml三蒸水中即成; 方法与步骤: 根据Marshall氏法高效价的抗人球蛋白兔免疫血清,分离球蛋白。 1. 用0.15 mol/L NaCl的盐水及0.15 mol/L pH9.0的NaHCO3-Na2CO3缓冲液稀释使每毫升内含抗体10mg,缓冲液为总量的10%; 2. 将以上溶液降温至4℃,按蛋白:荧光素=50—80mg:1mg的比例加入异硫氰酸荧光素,在0—4℃下电磁搅拌12—14h; 3.用半饱和硫酸铵将标记球蛋白
5. 过柱。取透析过夜的标记物,过葡萄糖凝胶G-25或G-50柱,分离出游离荧光素,收集标记的荧光抗体进行鉴定。
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