GST pull-down试剂盒|GST 蛋白相互作用 P
ull-Down 试剂盒|高效纯化/灵敏度高/特异性强| GST pull-down kit| GST Protein Interaction Pull-Down Kit- ￥379
- 武汉金开瑞生物工程有限公司作为一家专业致力于为全球制药企业、诊断试剂企业、科研试剂研发企业、高校和科研院所以及大型医院提供蛋白及相关研究技术服务的高新技术企业，能够承接10余项分子互作技术服务，囊括核酸与核酸、核酸与蛋白、蛋白与蛋白之间相互作用的检测。
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- 2026年04月29日
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- 提供商：
武汉金开瑞生物工程有限公司
- 服务名称：
GST pull-down试剂盒
- 规格：
小规格，具体私聊
GST Pull-Down实验基于GST(glutathione-S-transferase),即谷胱甘肽-S-转移酶蛋白，可以与谷胱甘肽(Glutathione,GSH)结合,将GSH固定于磁珠上,形成GSH-磁珠,将已知蛋白X与GST融合表达,获得的GST-X蛋白可与GSH-磁珠结合，若体系中存在与X蛋白互做的蛋白Y,则会形成“磁珠-GSH-GST-X-Y”复合物,与X蛋白互做的蛋白即可被分离并检测。
实验流程
试剂盒组分
常见问题
通过pull-down后WB验证发现,虽然可见目的条带,但是背景很高:
多方面原因造成:
1)实验仪器或试剂被污染,使用洁净的仪器及试剂。
2)转移膜上的目特异吸附导致背景高,实验操作过程中载手套,使用镊子来取,不要接触膜转移面。
3)制备样品中可能有不完全溶释的大的蛋白复合体,则在制备样品后进行知暂超声处理(3次,每次5秒钟),然后离心,取上清后进行后续试验。
4)洗涤不彻底,则需要多次洗涤,并设新增加洗涤液中的NaCl和去垢剂浓度。
5)使用了过多的细胞或组织进行裂解导致背景高,则须减少样本量,推荐100-500ug细胞裂
解物。
6) 蛋白降解也可能出现高背景的情况,尽量使用新鲜制备的样品。
更多内容请查看zuixinban说明书
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文献和实验一、GST pull-down 基本知识1. GST pull-down 概念GST pull-down：是利用重组技术将探针蛋白与 GST 谷胱苷肽巯基转移酶融合，融合蛋白通过 GST 与固相化在球珠上的 GSH 谷胱甘肽结合。从而分离出能与融合蛋白相互作用的蛋白的技术。2. GST pull-down 研究对象二、GST pull-down 原理1. GST pull-down 结合原理2. GST pull-down 分离原理三、GST pull-down 流程1. 蛋白的抽提与纯化：①
，那么这就不能算是纯粹的体外验证蛋白与蛋白相互作用的实验了，再此不多做讲述。03GST pull-down千呼万唤始出来，终于要见证两个蛋白的相爱了，好激动！1. 纯化好的 GAT-A beads 在使用前用冰 PBS 洗 3 遍，每遍 500 g/min，4 ℃ 离心 5 min。2. 加入适量的 His-B 纯化蛋白（作者君认为 10ug 的量做 pull-down 已经足够了），binding buffer 是 PBS。3. 4 ℃ 转动孵育 1 h。4. 洗去非特异性结合：作者君一般是用 GST
1.GST-Pull-Down原理 http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3828600_0.html http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1168462_0.html http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/1197579_0.html 2.GST-Pull-Down试剂盒购买 http://www.dxy.cn/bbs/actions
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