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- 英文名:
Anti-Ub TUBE 1,Agarose
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艾美捷科技
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泛素串联结合实体1,琼脂糖偶联,Anti-Ub TUBE 1,Agarose,泛素串联结合实体1
泛素串联结合实体1,琼脂糖偶联-Anti-Ub TUBE 1,Agarose
产品货号:LSS-UM-0401-1000
产品规格:1mL
泛素蛋白(Ub)是存在于所有真核细胞中的高度保守的8kDa多肽,通过三种酶的顺序作用与靶蛋白中赖氨酸残基的ε-氨基缀合,E1Ub活化酶,E2偶联酶和E3连接酶。另外,Ub内的7个赖氨酸本身可以作为Ub受体,导致形成多聚泛素蛋白链。在这些K48和K63连接中有很好的特征。K48连接的多聚泛素化靶向用于蛋白酶体降解的蛋白质,而K63连接调节信号事件,受体内吞作用和免疫应答。其它赖氨酸的多聚泛素蛋白连接尚不显著,其生理作用仍然大部分未知。

液体溶液,含50%的琼脂糖匀浆基于已知对泛素具有超强亲和力的蛋白质结构域,已经开发了串联泛素结合实体(TUBE)用于分离和鉴定泛素化蛋白质。相比于单泛素结合相关结构域(UBA),TUBE对多聚泛素蛋白基团的亲和力会高1000倍。另外,TUBE保护多泛素化蛋白免于去泛素化和蛋白酶体降解,允许以相对低的丰度进行检测。这些性质有效地允许TUBE以其多聚合状态“捕获”蛋白质。 TUBE可用于从细胞和组织提取物中分离,富集和鉴定泛素化蛋白。

泛素串联结合实体1,琼脂糖偶联-Anti-Ub TUBE 1,Agarose建议收到产品后置于-20℃中保存。更低的温度将会导致冰冻或者功能损失。
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文献和实验Single tube confirmation PCR protocol
(final elongation) 5. Agarose gel electrophoresis - Add 10 µl 6x loading buffer (30% glycerol, 50mM EDTA, 0.25% bromophenol blue) to the 50 µl PCR reaction. - Load 10 µl on a 1.5% agarose gel.
Single tube confirmation PCR protocol
but this step is labor intensive and we have not found it to be necessary. 4. PCR conditions: 3 min, 94 °C (initial denaturation) ---> 15 sec, 94 °C 35 cycles: ---> 15 sec, 57 °C ---> 60 sec, 72 °C 3 min, 72 °C (final elongation) 5. Agarose gel
it self is very similar to a standard CaCl2 transformation. Place 100 µl of TB buffer in a tube on ice. Melt the ligation mix at 65℃ for 5 minutes and add a 5-15 µl aliquot of the ligation mix to the TB solution and vortex quickly. Add 200 µl of competent
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