原代内膜细胞培养体系

二、细胞培养状态
在技术部标准操作流程下，建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          

3. 细胞收货
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
 公司正在 销售的产品：
IRF9 Antibody (Clone#21I34)　Anti-IRF9 Antibody (Clone#21I34)
EHMT2 Antibody (Clone#22E43)　Anti-EHMT2 Antibody (Clone#22E43)
MCM6 Antibody (Clone#30M83)　Anti-MCM6 Antibody (Clone#30M83)
PPIL6 Antibody (Clone#OTI4F2)　Anti-PPIL6 Antibody (Clone#OTI4F2)
ERI1 Antibody (Clone#OTI1B3)　Anti-ERI1 Antibody (Clone#OTI1B3)
ANK1 Antibody (Clone#5H2E8)　Anti-ANK1 Antibody (Clone#5H2E8)
GILZ/TSC22D3 Antibody (Clone#OTI3F3)　Anti-GILZ/TSC22D3 Antibody (Clone#OTI3F3)
YY1 Antibody (Clone#2C10F9)　Anti-YY1 Antibody (Clone#2C10F9)
SELPLG Antibody　Anti-SELPLG Antibody
FHIT Antibody (Clone#24F24)　Anti-FHIT Antibody (Clone#24F24)
DPYSL5 Antibody (Clone#23D20)　Anti-DPYSL5 Antibody (Clone#23D20)
TRBP/TARBP2 Antibody　Anti-TRBP/TARBP2 Antibody
CSNK1E Antibody (Clone#OTI5D4)　Anti-CSNK1E Antibody (Clone#OTI5D4)
Annexin A10/ANXA10 Antibody (Clone#OTI4D8)　Anti-Annexin A10/ANXA10 Antibody (Clone#OTI4D8)
GAS7 Antibody (Clone#OTI2F6)　Anti-GAS7 Antibody (Clone#OTI2F6)
PDE6B Antibody (Clone#8I2F10)　Anti-PDE6B Antibody (Clone#8I2F10)
CD44 Antibody  (Clone#OTI1E3)　Anti-CD44 Antibody  (Clone#OTI1E3)
SDHB Antibody (Clone#OTI3F5)　Anti-SDHB Antibody (Clone#OTI3F5)
cIAP1/BIRC2 Antibody　Anti-cIAP1/BIRC2 Antibody
APC3/CDC27 Antibody　Anti-APC3/CDC27 Antibody
HSC70/HSPA8 Antibody　Anti-HSC70/HSPA8 Antibody
Neurofibromin 1/NF1 Antibody (Clone#4C6F10)　Anti-Neurofibromin 1/NF1 Antibody (Clone#4C6F10)
CDKN2C Antibody (Clone#22C99)　Anti-CDKN2C Antibody (Clone#22C99)
Integrin beta-6/ITGB6 Antibody (Clone#OTI1D2)　Anti-Integrin beta-6/ITGB6 Antibody (Clone#OTI1D2)
all Actin Isotypes Antibody　Anti-all Actin Isotypes Antibody
四、注意事项
1、使用产品时应注意无菌操作，避免污染。
2、本产品含有血清和双抗，如无特别需要不用额外再添加血清和双抗，可以直接使用。
3、为保持本产品的最佳使用效果，不宜将其长时间放置于室温或较高的温度环境中。
4、所有产品请于保质期内使用，超出保质期，必须放弃使用。
5、本产品只供进一步科研使用，不可应用于临床等其他方面。
特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。