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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 服务名称:
分子量表征—高分辨分子量检测
- 提供商:
百蓁生物
服务介绍
分子量测定是蛋白质样品质量控制的重要环节。使用高分辨质谱分析电喷雾得到的多电荷信号,利用 PEAKS ID 对信号进行去卷积分析,可获得精确分子量数值。
技术流程

服务优势
1.采用Orbitrap Eclipse 质谱仪,可提供超高分辨率、高灵敏度和高质量精度的检测;
2.使用PEAKS ID 软件对信号进行去卷积分析及对蛋白质翻译后修饰自动注释(如糖基化、N端焦谷氨酸环化、C端赖氨酸丢失等),获得高质量的精确分子量。
应用领域
1.测定大分子蛋白质样品(约10-150KD)的完整精确分子量,可以测定抗体类药物完整分子量、还原分子量、完整脱糖分子量、还原脱糖分子量、亚结构片段分子量;
2.可以初步分析蛋白质的修饰状态(比如糖基化、磷酸化、氧化、C末端K缺失情况等),并进行相对定量分析
案例分享
如下图所示,将标准品 Intact mAb Mass Check Standard 进行还原切糖和只还原不切糖的处理后,通过 PEAKS ID 软件可以得到蛋白标准品轻重链的精确分子量。

图 | Intact mAb Mass Check Standard 还原切糖处理后,通过PEAKS ID 软件解析轻重链的精确分子量

图 | Intact mAb Mass Check Standard 还原处理后,通过PEAKS ID 软件解析的重链精确分子量
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文献和实验质谱平台多套色谱及色谱柱体系检测相同的内标物(2-氯-苯丙氨酸:理论精确分子量,199.040009)的 5 种保留时间出峰情况: 图 1 | 平台 A 11 月数据,Waters T3 色谱柱检测 图 2 | 平台 A 8 月数据,Waters T3 色谱柱检测 图 3 | 平台 B 7 月数据,Waters T3 色谱柱检测 图 4 | 平台 C 11 月数据,Thermo C18 色谱柱检测 图 5 | 平台 B 11 月数据,Waters T3 色谱柱检测 对比结果如下表所示
-MS)是在毛细管的出口处施加一高电压,所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带电液滴,随着溶剂蒸发,液滴表面的电荷强度逐渐增大,最后液滴崩解为大量带一个或多个电荷的离子,致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相。电喷雾离子化的特点是产生高电荷离子而不是碎片离子,使质量电荷比(m/z)降低到多数质量分析仪器都可以检测的范围,因而大大扩展了分子量的分析范围,离子的真实分子质量也可以根据质荷比及电行数算出。 电喷雾质谱的优势就是它可以方便地与多种分离技术联合使用,如液一质联用(LC-MS)是将液相
Assisted Desorption Electrospray Ionization,AFADESI,简称为AFAI)-MSI 质谱成像技术,开发了图形化交互界面的数据处理软件,实现了独特的生物组织空间代谢组学分析。AFAI-MSI 是一种高灵敏、高覆盖、宽动态范围、强特异性的组织中代谢物成像分析技术,灵敏度可达到 pg 级、代谢物含量动态范围跨越 3 个数量级,实现了组织微区的精确表征和质量数相近代谢物的准确识别。该技术解决了生物组织中低含量代谢物难检测、覆盖种类少和成像质量差等技术难题,可实现生物
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