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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
46
- 英文名:
兔肌腱成纤维细胞
- 物种来源:
兔
- 规格:
5×105
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 兔肌腱成纤维细胞 | 5×105 | XG-X5367 |
兔肌腱成纤维细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
在技术部标准操作流程下,建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
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四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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文献和实验为了逃避免疫攻击,癌细胞又出新招!Cancer Cell 发现连胶原蛋白也「叛变」了……
蛋白 I 型胶原蛋白是体内最丰富的蛋白质,由成纤维细胞产生,主要存在于骨骼、肌腱和皮肤中。在其正常形式中,胶原蛋白是由两条 α1 链(Col1a1)和一条 α2 链(Col1a2)组成的异源三聚体,它们组装形成三螺旋结构,作为细胞外基质的一部分。然而,在研究人类胰腺癌细胞系时,研究人员发现这些细胞会产生非典型形式的胶原蛋白。 他们发现这些细胞仅表达编码 α1 链的基因(Col1a1),而成纤维细胞则同时表达这两种基因。进一步分析表明,癌细胞通过表观遗传高甲基化使编码 α2 的基因(Col1a2)沉默
子蛋白质或多肽,能够通过与细胞表面受体结合,调节细胞的增殖、分化和功能。它们在干细胞的自我更新、分化以及维持干细胞特性中发挥重要作用。 细胞因子在不同干细胞分化中的应用 a.胚胎干细胞(ESC)和诱导多能干细胞(iPSC) bFGF(碱性成纤维细胞生长因子):常用于维持胚胎干细胞和 iPSC 的未分化状态。 Activin A:用于诱导 iPSC 分化为内胚层细胞。 TGF-β超家族成员(如 BMP-4):可诱导 iPSC 分化为中胚层细胞。 VEGF(血管内皮生长因子):在诱导 iPSC 分化
较简单;但容易产生杂质如成纤维细胞等,成纤维细胞生长快,故培养之细胞质量较差;培养的大多数细胞无收缩性;且原代细胞的获得需3~4周,获得大量平滑肌细胞耗时长(17)。既往酶消化法较组织块法复杂、精细;适宜的酶浓度和培养时间的确定较为困难;然而在较短时间内可获得大量的平滑肌细胞,1996年有学者报道(Chambers(18)等)酶消化法纯度为70%。可见一种快速、高效、高纯度的酶消化法培养膀胱平滑肌的方法显得尤为重要。 本实验研究两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑
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