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PCR引物合成实验
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伊莱博生物科技(上海)有限公司
分子实验技术服务
PCR引物合成实验:引物合成是通过测定引物的OD值,溶解引物,终合成引物的一个完善的过程。
目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。亚磷酰胺三酯法合成DNA的片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端合成的,相邻的核苷酸通过3′→5′磷酸二酯键连接。引物合成特点:1.引物合成的纯度高。2.合成的序列长。3.合成的效果好。
引物OD数的定量:用紫外分光光度计,波长260nm,石英比色杯,光程为1厘米,测定溶液的光密度。测定时溶液的光密度稀释到0.2-1.0之间。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后,用1ml水稀释测OD值。需要根据稀释倍数换算出母液的OD值
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