人破骨细胞

二、细胞培养状态
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人破骨细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈圆形，  不规则细胞，在技术部标准操作流程下，细胞不建议传代；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
使用方法
1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化；
3)用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)；消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化；
3)经1000rpm，离心5min，丢弃上清，用5ml完全培养基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内；
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
公司正在 销售的产品：

大鼠蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA试剂盒 ，英文名： PICK1 ELISA Kit	兔子脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA 试剂盒 96T/48T
大鼠糖原0酸化酶B(PYGB)ELISA试剂盒 ，英文名： PYGB ELISA Kit	大鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA 试剂盒 96T/48T
人多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA 试剂盒 96T/48T	人热休克蛋白20(HSP-20)ELISA 试剂盒 96T/48T
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小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA 试剂盒 96T/48T	Anti-BrdU 溴脱氧尿苷抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
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大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA 试剂盒 96T/48T	Anti-BMP4/FITC 荧光素标记骨形态发生蛋白4抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
大鼠血清(NO)ELISA 试剂盒 96T/48T	Anti-CD155/PVR 受体抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
小鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISA 试剂盒 96T/48T	人破骨细胞Anti-FGF-8/HBGF-8/FITC 荧光素标记成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml
大鼠配对框基因6(PAX6)ELISA试剂盒 ，英文名： PAX6 ELISA Kit	大鼠腹腔主动脉平滑肌细胞
人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA 试剂盒 96T/48T	小鼠子宫内膜间质细胞

四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和技术部沟通；由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。