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小鼠胸主动脉平滑肌细胞

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  • ¥4050
  • 西格
  • XG-X4760
  • 国产
  • 2025年07月14日
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      上海西格

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      42

    • 英文名

      小鼠胸主动脉平滑肌细胞

    • 生长状态

      贴壁

    • 细胞形态

      成纤维细胞样

    • 物种来源

      小鼠

    • 组织来源

      主动脉组织

    • 规格

      5×105

    小鼠胸主动脉平滑肌细胞
    商品属性:
    产品名称 规格 货号
    小鼠胸主动脉平滑肌细胞 5×105 XG-X4760
    一、细胞基本属性
    组织来源 主动脉组织
    种属来源 小鼠
    产品规格 5×105cells/T25细胞培养瓶
    细胞简介 小鼠主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用,以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象,探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点;体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
    包被条件  
    培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
    换液频率 每2-3天换液一次
    生长特性 贴壁
    细胞形态 成纤维细胞样
    传代特性 可传3代左右
    传代比例  
    消化液 0.25%胰蛋白酶
    培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
    方法简介:实验室分离的小鼠主动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
    质量检测:实验室分离的小鼠主动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
    小鼠胸主动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
    产品细节图片1 产品细节图片2
    二、细胞培养状态
    发货时发送细胞电子版照片
    小鼠主动脉平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在技术部标准操作流程下,可传3代左右;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
    使用方法
    1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
    2. 贴壁细胞消化
    1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
    3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          
    3. 细胞收货脱落
    1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
    2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
    3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
    4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
    5)原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。
    4. 细胞实验
    因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
    公司正在 销售的产品:
    大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒 ,英文名: LH ELISA Kit 兔抑瘤素M(OSM)ELISA 试剂盒 96T/48T
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    Anti-RhoA /FITC 荧光素标记RhoA抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml Anti-5-HTR1B 5-羟色胺受体1B抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
    人Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA 试剂盒 96T/48T Anti-CA I/FITC 荧光素标记酶1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
    大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 ,英文名: OPG ELISA Kit Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 荧光素标记神经母细胞特异性转移因子抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
    大鼠血管紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)ELISA试剂盒 ,英文名: ACEⅠ ELISA Kit Anti-EphA2/Eph receptor A2 内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
    小鼠β酚(β-naphthol)LISA 试剂盒 96T/48T 小鼠胸主动脉平滑肌细胞Anti-TCF7L2 转录因子7类似物2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
    大鼠内脏脂肪特异性丝酸蛋白酶抑制剂(vaspin)ELISA 试剂盒 96T/48T 小鼠肝窦内皮细胞
    人信号转导分子(Smad1)ELISA 试剂盒 96T/48T 大鼠子宫成纤维细胞

    四、注意事项
    1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
    2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
    3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
    4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。 

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      培养了快一个月的细胞了,今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代(图1),16天后第二代(图2),22天后第三代(图3),并做a-actin免疫细胞化学鉴定(图4)。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。

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      组织化学染色。(α-SM-actin免疫组织化学鉴定)胰酶消化法培养平滑肌细胞1.1 试剂和动物胰酶购自Sigma公司;α-actin抗体购自中山生物技术有限公司;PBS液各成分均为市售分析纯;新生小牛血清购自HyClone;DMEM为Gibco产品。雄性Wistar大鼠(2只,体重175±25 g)购自中国医学科学院实验动物中心。1.2 胰酶消化法原代培养Wistar大鼠处死,迅速取出胸主动脉,浸泡在含无菌PBS的表面皿中,转移到无菌超净台。在表面皿中漂洗主动脉去除残留的血迹,纵向剪开主动脉,把主动脉铺平

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