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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温
- 库存:
现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
5×10⁵Cells/T25培养瓶
| 产品名称 | 人外周血B淋巴细胞 | ||||||||||||||||
| 组织来源 | 外周血 | ||||||||||||||||
| 产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | ||||||||||||||||
| 细胞简介 | 人外周血B淋巴细胞分离自外周血;B淋巴细胞的祖细胞存在于胎肝的造血细胞岛中,此后B淋巴细胞的产生和分化场所逐渐被骨髓所代替。B淋巴细胞简称B细胞,成熟的B细胞主要定居于淋巴结皮质浅层的淋巴小结和脾脏的红髓和白髓的淋巴小结内。B细胞在抗原刺激下可分化为浆细胞,浆细胞可合成和分泌抗体(免疫球蛋白),主要执行机体的体液免疫。与T淋巴细胞相比,它的体积略大。这种淋巴细胞受抗原刺激后,会增殖分化出大量浆细胞。浆细胞可合成和分泌抗体并在血液中循环。从骨髓来的干细胞或前B细胞,在迁入法氏囊或类囊器官后,逐步分化为有免疫潜能的B细胞。成熟的B细胞经外周血迁出,进入脾脏、淋巴结,主要分布于脾小结、脾索及淋巴小结、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小结中,受抗原刺激后,分化增殖为浆细胞,合成抗体,发挥体液免疫的功能。 | ||||||||||||||||
| 方法简介 | 普诺赛实验室分离的人外周血B淋巴细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法结合磁珠分选制备而来,细胞总量约为5×10⁵ cells/瓶。 | ||||||||||||||||
| 质量检测 | 普诺赛实验室分离的人外周血B淋巴细胞经CD19免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 | ||||||||||||||||
| 培养信息 |
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文献和实验人外周血B淋巴细胞体外培养周期有限;建议使用普诺赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血,用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释,上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中,先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液(1.077 g/mL),再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液,血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注:Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温,温度过高会导致分离不明显,温度过低会导致密度过大,同样分离效果不好, 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移
。如果直接倒掉,离心管内会有残留裂解液,后续加入100 μL PBS重悬细胞时,可能不能完全稀释裂解液,导致红细胞裂解过度。 6. 细胞沉淀重悬,可用枪轻轻吹打,或者用转速小的涡旋仪涡旋。 7. 人血样本建议染CD45,有利于后续数据分析时圈门。 8. 处理人血样本时,推荐设置只染CD45的单染管低速上机用来设置阈值,观察细胞量,圈淋巴细胞群。 9. 人外周血中主要含T淋巴细胞,B淋巴细胞的量较少。如果使用病人的血液样本,B淋巴细胞的量可能更少,因此B淋巴细胞的检测不推荐使用过夜的样本,过夜样本易导致
度的功能细胞。二、人外周血中 CD4 T 细胞分选实例1.产品信息: MojoSort™ Human CD4 T Cell Isolation Kit(BioLegend, Cat#480009),阴性分选试剂盒2.检测仪器型号:BD LSRⅡ3.样本:正常人外周血4.分选前后检测相关产品:PE-CD4(Biolegend, Cat# 317410)5.实验过程(1)采血之后采用达优™ 人淋巴细胞分离液分离人外周血单个核细胞。分离之后能见到明显的白膜层。(达优,Cat#DKW-KLSH-0100











