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    首页 / 试剂 / 生物化学 / Exosupur®血浆血清或微量复杂样本外泌体分离试剂盒
    Exosupur®血浆血清或微量复杂样本外泌体分离试剂盒
    文献支持

    Exosupur®血浆血清或微

    量复杂样本外泌体分离试剂盒
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    价格: ¥700 - 3800
    品牌: 恩泽康泰
    免费试用 优质试用报告提升试用成功率
    距离结束
    xx xx xx xx
    试用份额:
    3
    试用说明:
    1、试用品规格:ES9P021e
    2、运费: 不包邮 ;到付
    3、联系时间: 试用活动结束后的1天内
    4、申请要求: 几十个以上血浆样本分离外泌体需求的客户
    5、其他说明: 微量样本200ul左右
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      • 库存:

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      • 英文名:

        Exosupur® small extracellular vesicles purification kit for plasma/serum

      • 保质期:

        12个月

      • 供应商:

        北京恩泽康泰生物科技有限公司

      • 保存条件:

        2-8℃保存

      • 规格:

        ES9P11e(1ml*1pcs)/ES9P14e(1ml*4pcs)/ES9P021e(0.2ml*1pcs)/ES9P024e(0.2ml*4pcs)

      规格: ES9P11e(1ml*1pcs) 产品价格: ¥1000.0
      规格: ES9P14e(1ml*4pcs) 产品价格: ¥3800.0
      规格: ES9P021e(0.2ml*1pcs) 产品价格: ¥700.0
      规格: ES9P024e(0.2ml*4pcs) 产品价格: ¥2500.0

         一、产品介绍:

        Exosupur® sEV纯化试剂盒,是基于分子尺寸排阻色谱SEC原理进行小细胞外囊泡sEV的分离纯化,适用于血浆、血清等成分复杂生物样本,以及微量血浆/血清(200µl)复杂生物样本的外泌体分离纯化,具有纯度高、得率好、方便快捷等优势,是复杂样本外泌体组学、功能研究的好助手。

        针对1ml的常量血浆/血清到0.2ml微量血浆/血清等成分复杂生物样本sEV分离提供系统性解决方案。

         

        二、产品规格:

        1)Exosupur®sEV分离kit-1ml血浆/清排阻柱

        规格:ES9P11e & ES9P14e

        1)1ml*1pcs,上样1ml*5次重复=5ml,5个样本

        2)1ml*4pcs,上样1ml*4根*5次重复=20ml,20个样本

        2)Exosupur®sEV分离kit-微量血浆/清排阻柱

        规格:ES9P021e & ES9P024e

        1)0.2ml*1pcs,上样0.2ml*5次重复=1ml,5个微量样本

        2)0.2ml*4pcs,上样0.2ml*4根*5次重复=4ml,20个微量样本

         

        三、产品原理:

        国际细胞外囊泡协会(ISEV)建议的最小实验要求(MISEV2023)中,关于基于商业化试剂盒分离EV的建议如下:

        分子尺寸排阻色谱法SEC原理:生物流体样品加入含有具有固定孔隙的SEC填充材料的排阻柱中,粒径较小的分子如蛋白、脂类等可进入填充材料的固定孔隙,而较大粒径的分子或颗粒不能进入孔隙只能进入填充材料间隙。因此加入缓冲液的作用下,较大粒径的囊泡因只能进入材料间隙流速快在前面的馏分中被洗脱,而小分子杂质则需要更长的洗脱时间才能流出,从而实现EV的分离。

        分子尺寸排阻色谱法SEC在诸多分离方法中综合性能较高,并且使用频次仅次于超离,在EVs专刊JEV中的研究占比日益提高

        Exosupur®血浆/血清 sEV纯化试剂盒即是基于SEC方法开发的,针对血浆/血清等成分复杂体液样本的sEV外泌体专用分离纯化试剂盒。

         

        四、产品应用:

        1. 1ml和微量排阻柱分别适用于常量或微量血浆/血清等复杂生物样本;

        2. 分离的复杂生物样本来源sEV纯度更高,杂质干扰更少,适用于高通量测序、质谱等组学研究,以及下游的PCR、WB、WLISA验证等表达定量研究,定量更准确;

        3. 通过本试剂盒分离复杂生物样本来源sEV,方法温和简单,不影响外泌体性质和活性、不引入聚集和其他杂质等影响,可用于细胞、动物的功能机制研究实验;

        4. 复杂样本sEV纯化相关的方法学开发中,本试剂盒可作为对照方法使用。

         

        五、产品优势:

        1. 操作简便:无需特殊设备,柱平衡、上样、外泌体收集、外泌体浓缩4步操作,从上样到分离完成仅需30min;

        2. 性能优越:对于常量血浆样本Exosupur®1ml血浆/清排阻柱可回收最高达95%的荧光脂质体,杂蛋白去除率高达99.5%;微量血浆/清排阻柱可回收高达94%纳米颗粒,杂蛋白去除率平均为98%;

        3. 稳定性高:只回收固定尺寸范围的外泌体,产物粒径范围窄;实验受外界因素波动的影响比较小;不引入其他的物理(如超离的超高速离心力)和化学因素(如沉淀法的PEG颗粒),可以保持完整的外泌体形态和功能;

        4. 性价比高:通过对排阻柱进行清洗再生,可重复使用5次,即单根排阻柱可处理5个样本;

        5. 质量可靠:Exosupur®系列sEV纯化试剂盒高效便捷,已辅助客户发文70篇+,不乏IF 10以上的高质量文献,经受了行业专家的检验,获得北京市新技术新产品认定。

         

        六、性能数据

        Exosupur®分离的血浆或微量血浆小细胞外囊泡sEV 经TEM电镜、WB和nanoFCM粒径表征质量可靠。

         

        Exosupur®1ml血浆/清排阻柱对于血浆样本可回收高达95%的荧光脂质体,杂蛋白去除率高达99.5%;微量血浆/清排阻柱可回收高达94%纳米颗粒,杂蛋白去除率平均为98%;

        下左图为1ml血浆/清排阻柱(ES9P14e、ES9P11e)分离1mL血浆sEV效果,下右图为微量血浆/清排阻柱(ES9P021e、ES9P024e)分离0.2mL微量血浆sEV的效果。

        下第2排图片,Western Blot中可以看出血浆中主要的miRNA结合蛋白更少,杂蛋白更少。高纯度外泌体更有利于RNA组学、蛋白组学及细胞功能学和在体实验研究。

         

         

        通过分离的血浆sEV particle数与蛋白含量比值评估外泌体纯度,与其他试剂盒或经典超离UC相比,Exosupur®分离的外泌体纯度更高,杂蛋白含量更低。

         

        数据来自于J Transl Med. 2021 Mar 12;19(1):104. 

         

        对于低表达量的长RNA,与其他试剂盒或经典超离UC相比, Exosupur®分离的血浆sEV能够得到更高丰度的长链RNA,更有利于mRNA + LncRNA研究。

         

        数据来自于J Transl Med. 2021 Mar 12;19(1):104. 

         

        对于miRNA,与其他试剂盒或经典超离UC相比,由于Exosupur®富集的外泌体得率更高、纯度更高,使得富集于sEV的miRNA定量值更高,而非富集miRNA定量值非常低,能够更准确分析sEV来源miRNA。

         

        数据来自于J Transl Med. 2021 Mar 12;19(1):104. 

         

        Protein K和RNase A双酶消化Exosupur®和其他试剂盒得到的EVs,进一步证实了Exosupur®得到的sEV RNA更多的是来源于囊泡,而囊泡外的游离RNA检测值更低。

         

         

        Exosupur®分离的外泌体进行蛋白质组研究时,与经典的超离UC相比,可检测到更丰富的囊泡特异的标志物蛋白,表明外泌体纯度高,有利于检测到更多的外泌体来源的蛋白;提升检测蛋白数量,有利于不同样本之间的差异分析;与已发表文章、数据库具有较多overlap,表明数据可靠,能够准确的对外泌体蛋白进行研究。

         

        对比不同的SEC分离方法:经过Exosupur®试剂盒收集的馏分,具有最高的荧光强度(A)和最低的蛋白质浓度(B和C),表明Exosupur®具有最有效的EVs回收率和最低的游离蛋白质污染。

         

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        七、常见问题FAQ

        Q:该试剂盒分离外泌体需要自备的内容有哪些?

        A:1)无菌PBS溶液(须用0.22μm滤膜过滤,建议新鲜配置或采购已过膜的PBS,4°C冰箱保存的PBS溶液需先平衡至室温);

        2)20%无水乙醇(须超声条件脱气20min或配置好后静置过夜);

        3)超滤管(截留分子量100kD);

        4)收集管(1.5mL EP管和15mL离心管);

        5)样品(上样前需平衡到室温)。

         

        Q:如果是0.5ml左右的血浆样本应该用哪一款试剂盒?

        A:直接稀释到1ml上样到Exosupur® ES9P11e/ES9P14e 1ml血浆排阻柱

         

        Q:Exosupur® 微量血浆/清排阻柱的上样0.2ml指的是原始血浆/血清吗?

        A:指的是经过低速离心和过0.45 μm滤膜处理后的样本,0.2ml。请注意滤膜过滤会损失约100 μl。如果只用0.2ml血浆进行滤膜过滤建议客户再用约100 μl PBS进行二次过膜润洗。

         

        Q:样本收集完了,颜色还在中间,是否有问题?

        A:按照操作说明来做,就没问题,一般是颜色滞后,因为颜色都是小分子成分,会靠后出来,外泌体会先流出,故不能以颜色作为外泌体收集的判断。

         

        Q:用完了是直接用封闭液冲洗,还是2倍柱体积PBS冲了再用1倍柱体积封闭液冲?

        A:如果本次接着用就不用封闭液清洗;如果本次不用了,需保存起来下次用,那么本次就用PBS冲洗后再封闭液冲洗。

         

        Q:分离后的外泌体如何保存?
        A:外泌体保存问题跟分离方法无关,是由其本身特性决定的,如果条件允许最好使用新鲜的外泌体进行实验,冻存的外泌体容易产生团聚并出现沉淀。实际研究中,外泌体功能实验往往需要大量的外泌体不得不分批提取保存时可-80℃保存;但做biomarker研究时,如RNA组学等,提取外泌体后需尽快完成RNA提取等后续实验。

      温馨提示:不可用于临床治疗。

      风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

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