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- 2026年04月23日
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复性原理：在电泳过程中，SDS与样品中的MMPs结合（当然是可逆性结合），破坏其氢键、疏水键而使MMPs不能发挥其分解明胶的作用，而只有当将胶置Triton中洗脱（最好是放在摇床上摇，30min/次，做2次或15min/次，4次。静置于Trition中是不妥的。）时，由于SDS被Triton结合而去除，从而使MMPs恢复了活性。
细胞外基质（ECM）扮演着细胞内重要的生存支持系统，其组成不仅包括胶原、糖蛋白、蛋白多糖等元素，还富含大量的蛋白酶、细胞因子以及黏附分子。在肿瘤转移的复杂过程中，ECM的基底膜特别是一个生理屏障，必须被克服。基质金属蛋白酶家族（MMPs）则能够降解细胞外基质，协助肿瘤细胞克服这一屏障，为细胞增殖提供必要的空间。MMP2和MMP9是主要负责降解基底膜上IV型胶原和明胶的基质金属蛋白酶，它们与恶性肿瘤的浸润转移关系密切。通过蛋白电泳技术，可以检测MMP2和MMP9的活性。
MMP2和MMP9之前被称为明胶酶A和B，因为它们能够裂解变性的胶原蛋白或明胶。
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文献和实验明胶酶谱法 原理： Ø 酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺（SDS-PAGE，含0.1％明胶）电泳分离，然后在有二价金属离子存在的缓冲 系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性，在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶，最后用考马斯亮蓝将凝胶染色，再脱色，在 蓝色背景下可出现白色条带，条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。
panxiaoyun1115 各位大侠，请问MMP13可以做明胶酶谱法，用来区分MMP13的前体酶原和活化的MMP13吗？非常感谢！急盼！ zhujoker 明胶酶谱法主要是用来检测有活性的MMPs，所以理论上应该可以区分开的 panxiaoyun1115 版主，有活性的MMPS就是指活化的MMPS吗？或者是指：pro-mmps和活化的mmps，只要没有被特异性抑制物（TIMP）结合，都称为
【求助】关于培养中细胞的基质金属蛋白酶(MMPs)的检测问题
: detect the activity of MMPs topicare 谢谢chuckdouble，查了一些文献，还有丁香园里其他战友的经验，似乎单纯用明胶酶谱法只能检测部分MMPs类型，比如MMP2，MMP9吗？不知道明胶酶谱法还能不能检测培养中细胞所分泌的全部类型MMPs。 chuckdouble topicare wrote: 细胞所分泌的全部类型MMPs
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