- ￥300
- 博尔夫生物
- BF0030
- 湖北武汉
- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
1000
- 保质期：
1年
- 供应商：
博尔夫
- 保存条件：
4℃
- 规格：
60ml*2
产品名称：
超敏ECL显色试剂盒
产品货号：
BF0030
产品包装规格：
超敏ECL-A液（60ml/100ml） 超敏ECL-B液（60ml/100ml）
产品简介：
超敏ECL化学发光底物是基于Luminol的新一代增强型化学发光底物试剂，可与HRP标记的二抗催化发生化学反应发出荧光，通过化学发光成像仪或X光片压片呈现荧光强弱。
使用方法：
1、按常规Western blot实验步骤孵育一抗，二抗（HRP标记的二抗），洗膜。
2、最后一次洗膜时可以配制超敏ECL工作液：分别取等体积的A和B混合均匀（吸取A后换吸头再吸取B,以免污染，根据膜的大小配制），工作液配制好后需尽快使用，放置时间长会降低灵敏度。
3、最后一次洗膜后，用镊子取出膜，用滤纸吸去多余的洗涤液（注意不要接触膜的蛋白面），然后置于洁净保鲜膜上或塑料容器内。
4、在膜上滴加配制好的超敏ECL工作液，确保工作液均匀覆盖在膜上，避光孵育1-3min。
5、用滤纸吸掉多余的工作液，随后进行压片检测或化学发光成像检测。
6、压片：将膜固定于X光胶片暗盒内（蛋白面朝上），暗房内曝光X胶片，显影冲洗。
7、化学发光成像仪检测：将膜放置到化学发光成像仪内，参考仪器说明进行检测。
注意事项：
1、配好的工作液暴露于强光下较长时间会降低灵敏度。
2、长时间曝光会加深背景，使条带强弱趋势不明显，曝光不足条带会比较模糊。
3、由于该试剂盒极其灵敏，建议按照推荐比例稀释抗体，抗体浓度过高会容易出现背景。
保存条件：
2-8℃避光保存，1年有效，若长期不用，可放-20℃保存更长时间。
温馨提示：
使用前请详细阅读使用说明书，在有效期内使用，并做好个人防护。使用后请妥善处置废弃物。
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文献和实验方法也不同，常用的检测系统有化学发光检测（ECL）和化学显色 DAB 检测系统。 化学发光检测（ECL）： 利用 HRP 催化化学发光物质，生成一种不稳定的中间物质，其衰变时在暗室内形成明显的肉眼可见的化学发光带，利用 X 胶片感光 原理，将结果记录下来。 ECL 显色试剂配制：化学发光底物 A 和 B 按照 1：1 比例等体积混匀。 将混合好的显色底物覆盖印迹膜 1-5 min，黑暗条件下观察荧光效果。 在暗室可用放射自显影胶片或化学发光成像系统记录结果 。 如采用放射自显影胶片，曝光几秒
一般使用辣根过氧化物酶 HRP-ECL 发光法或碱性磷酸酶 AP-NBT/BICP 显色法。 1．HRP-ECL 发光法： 将 A、B 发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗，滤纸贴角吸干，反贴法覆于 A、B 混合液滴上，熄灯至可见淡绿色荧光条带（5 min 左右）后滤纸贴角吸干，置于保鲜膜内固定于片盒中，迅速盖上胶片，关闭胶盒，根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中 1～2 min，清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影，清水冲净晾干，标定
100pg 显色法 推荐产品: SuperECL Plus Western Blotting 超敏发光液 采用独特的发光底物系统，是世界上最灵敏的ECL Western Blot 化学发光试剂。用于Western Blotting 条带的荧光发光，检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP 的抗体及其关联的抗原。由两种溶液组成，使用前混合
