- ￥450
- Solarbio
- 北京
- BC5980
- 2025年07月16日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
Butyrylcholinesterase Inhibitor Activity Assay Kit
- 库存：
999
- 供应商：
北京索莱宝科技有限公司
- CAS号：
BC5980-50T/48S
- 规格：
50T/48S
丁酰胆碱酯酶抑制剂活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
货号: BC5980
规格: 50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 |
规格 |
保存条件 |
| 提取液 |
液体60 mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 试剂一 |
粉剂×2支 |
-20℃保存 |
| 试剂二 |
液体40 mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 试剂三 |
液体35 mL×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 试剂四 |
粉剂×1瓶 |
-20℃保存 |
| 试剂五 |
液体1 mL×1支 |
-20℃保存 |
溶液的配制：
1. 试剂一：临用前取1支试剂一，加入1.8mL蒸馏水，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装后可保存4周，避免反复冻融（该试剂为冻干试剂，可能存在不同瓶间肉眼观察试剂量相差较大甚至量很少的现象，此现象不影响使用，实际质量相同）。
2. 试剂四：临用前加入17mL试剂二，充分溶解，用不完的试剂-20℃可分装保存4周，避免反复冻融。
3. 试剂五：10mmol/L利凡斯的明溶液。临用前取15μL 10mmol/L利凡斯的明溶液，加入985μL蒸馏水，配制成0.15mmol/L利凡斯的明溶液，现用现配（此试剂用于阳性管实验，选做）。
产品说明：
丁酰胆碱酯酶（Butyrylcholinesterase，BchE，EC3.1.1.8），又称血浆胆碱酯酶，假性胆碱酯酶，是一种丝氨酸水解酶，由肝脏合成后进入血液，几乎存在于所有动物组织中。与乙酰胆碱酯酶（AchE）相比，BchE能够有效水解较大的胆碱酯，如丁酰胆碱和苯甲酰胆碱，而且可以清除有机磷类农药、氨基甲酸酯类农药等神经毒剂的毒害作用。有研究表明，BchE可作为阿尔茨海默病治疗的重要靶点，BchE抑制剂被用于改善阿尔茨海默病患者记忆力减退、认知功能障碍等病征。
BchE催化丁酰胆碱水解生成胆碱，胆碱与二硫代硝基 苯甲酸（DTNB）作用生成5-巯基-硝基 苯甲酸（TNB），BchE抑制剂通过抑制BchE活性，减少丁酰胆碱的水解。TNB在412nm处有吸收峰，可通过测定412nm处吸光度的变化，计算BchE抑制剂活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、天平、烘箱、粉碎仪/研钵/匀浆器、30-50目筛、超声清洗仪、离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体的操作步骤请见“产品资料”文件
注意事项：
1. 为保证实验结果的准确性和稳定性，请严格控制反应时间和操作时间。
2. 样本吸光度A’测定大于1.5或ΔA测定接近ΔA空白时，建议在样本处理步骤增加组织样本比例或将粉剂样本配制成更高浓度的溶液再进行测定。当ΔA测定小于0.01时，可以将样本用提取液稀释后再进行测定。
3. 若用于比较不同试剂、提取物、药物或组织对BchE的抑制程度，必须将试剂、提取物、药物或组织匀浆配制成相同浓度进行比较。
实验实例：
1. 取0.1005g柚果皮样本（烘干），加入1mL提取液进行超声提取，离心后取上清，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算：ΔA空白=（A’空白1-A空白1）-（A’空白2-A空白2）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA测定=（A’测定-A测定）-（A’空白2-A空白2）=（1.117-0.485）-（0.166-0.112）=0.578，计算抑制率得：
BchE抑制剂抑制率（%）=（1.113-0.578）÷1.113×100%=48.068%。
2. 取0.1014g柿果皮样本（烘干），加入1mL提取液进行超声提取，离心后取上清，稀释16倍后按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算：ΔA空白=（A’空白1-A空白1）-（A’空白2-A空白2）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA测定=（A’测定-A测定）-（A’空白2-A空白2）=（0.706-0.149）-（0.166-0.112）=0.503，计算抑制率得：
BchE抑制剂抑制率（%）=（1.113-0.503）÷1.113×100%=54.807%。
3. 取50μL 0.15mmol/L利凡斯的明溶液，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算：ΔA空白=（A’空白1-A空白1）-（A’空白2-A空白2）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA测定=（A’测定-A测定）-（A’空白2-A空白2）=（0.838-0.171）-（0.166-0.112）=0.613，计算抑制率得：
BchE抑制剂抑制率（%）=（1.113-0.613）÷1.113×100%=44.924%。
参考文献：
[1] Ellman GL, Courtney KD, Andres V Jr. et al. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity [J]. Biochemical Pharmacology, 1961, 7(2): 88-95.
[2] Noor Atatreh, Sara Al Rawashdah, Shaikha S Al Neyadi. et al. Discovery of new butyrylcholinesterase inhibitors via structure-based virtual screening [J]. Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 2019, 34(1): 1373-1379.
[3] Li Q, Chen Y, Xing S. et al. Highly Potent and Selective Butyrylcholinesterase Inhibitors for Cognitive Improvement and Neuroprotection [J]. Journal of Medicinal Chemistry, 2021, 64(10): 6856-6876.
相关系列产品：
BC0840/BC0845 羧酸酯酶（CarE）活性检测试剂盒
BC2020/BC2025 乙酰胆碱酯酶（AchE）活性检测试剂盒
BC2130/BC2135 组织及血液酸性磷酸酶（ACP）活性检测试剂盒
BC2140/BC2145 组织及血液碱性磷酸酶（AKP/ALP）活性检测试剂盒
BC5970/BC5975 丁酰胆碱酯酶（BchE）活性检测试剂盒
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验参考文献：
[1] Ellman GL, Courtney KD, Andres V Jr. et al. A new and rapid colorimetric determination of acetylcholinesterase activity [J]. Biochemical Pharmacology, 1961, 7(2): 88-95.
[2] Noor Atatreh, Sara Al Rawashdah, Shaikha S Al Neyadi. et al. Discovery of new butyrylcholinesterase inhibitors via structure-based virtual screening [J]. Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry, 2019, 34(1): 1373-1379.
[3] Li Q, Chen Y, Xing S. et al. Highly Potent and Selective Butyrylcholinesterase Inhibitors for Cognitive Improvement and Neuroprotection [J]. Journal of Medicinal Chemistry, 2021, 64(10): 6856-6876.
肠道洗脱和蛋白酶抑制剂相结合的方法，经过不断的摸索和优化，在肠微粒体生产过程中尽可能的抑制了酯酶的活性，而保护了肠道亚细胞组分中大多数的CYP450酶和UGT酶的活性，现已形成猴、犬、大鼠和小鼠四个种属的高酶活、稳定性好的肠微粒体自研产品。 IPHASE/汇智和源使用相同的孵育条件，将自研产品和进口同类产品的肠微粒体主要监测指标进行了比对，如CYP450酶活性、NADPH-cytochrome c reductase活性等，结果发现，进口产品和自研产品酶活均在接受范围以内，且自研产品的酶活可达
用蛋白或多肽标签融合于重组蛋白中，进而方便重组蛋白的纯化和检验。小分子标签通常免疫原性较低，且不影响目标蛋白功能而得以保留。但是大分子标签如 GST 因其对目标蛋白的结构和生物活性有所影响，通常需要去除。 今天我们就来聊一聊柱上酶切那点事儿~ 什么是柱上酶切 柱上酶切纯化路线是指在吸附了标签蛋白的层析柱上添加蛋白酶进行在位去除标签，具有更加灵活、高效、快速的特点。 相比于常规的洗脱后的酶切纯化路线，柱上酶切不仅可以简化酶切后的再次上样操作，同时可以尽量避免操作过程中目标
【求助】如何提取细胞中的cAMP？和普通蛋白的裂解buffer一样么？
。 贴壁细胞可以用一般的蛋白裂解Buffer，有时要加磷酸二酯酶抑制剂。 关于是否需要乙酰化的问题，不同的试剂盒有不同的要求，主要取决于抗体是否灵敏，也取决于最后检测的方法。一般乙酰化之后可以提高10倍的检测灵敏度。如果抗体灵敏，可以免去乙酰化的那一步，太容易引入误差。 另外，如果用荧光法、发光法检测碱性磷酸酶或者辣根过氧化物酶的话，也没必要进行乙酰化，因为荧光法、发光法检测比显色法检测灵敏度高。 另外，Promega公司有基于培养细胞的cAMP检测试剂盒
