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文献和实验吸出培养瓶中的培养基,用PBS液洗涤1-2次; 加入已经在37度预热的消化液(0。25%胰酶+0。02%EDTA)少量(估计可以平铺培养瓶底部即可); 在镜下看到细胞退缩变园,立即给予少量培养基终止消化,我一般的消化时间就在1分钟之内很好消化; 再用弯管吹打细胞成单细胞悬液后,按1:2或1:3分瓶即可。
上皮层。以PBS液漂洗眼杯2次,吸干; 4. 加入0.01%EDTA-0.125%胰蛋白酶的混合消化液,置于无菌的烧杯中。于37℃恒温箱中消化30min; 5. 吸去消化液。用PBS液稍洗。加入有血清培养液终止消化酶的作用,并用毛细吸管轻轻吹打眼杯内壁,以使视网膜色素上皮细胞脱落; 6. 收集眼杯内的细胞悬液,离心(800r/min)8min; 7. 弃上清液,将沉淀的视网膜色素上皮细胞重新用培养液悬浮。计数; 8. 以8×104—10×104
在 Am J Physiol Cell Physiol 上的一篇研究论文。题目:High glucose promotes the migration of retinal pigment epithelial cellsthrough increased oxidative stress and PEDF expression。从题目中,我们就可以看出,本文主要讲的就是高糖通过增加氧化应激和 PEDF 表达促进视网膜色素上皮细胞的迁移。题目有点长,其实文章内容也很多,多达 17 页!对于初学
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