辅酶ⅡNADP(H)含量检测试剂盒 微量法

辅酶II NADP(H)含量检测试剂盒（MTT显色法）说明书

                                            微量法

货号：BC1105

规格：100T/48S

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称	规格	保存条件
酸性提取液	液体25 mL×1瓶	2-8℃保存
碱性提取液	液体25 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂一	液体10 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂二	粉剂×1支	-20℃保存
试剂三	液体8mL×1瓶	2-8℃保存
试剂四A	粉剂×1支	-20℃保存
试剂四B	液体5mL×1瓶	2-8℃保存
试剂五	液体30 mL×1瓶	2-8℃保存
试剂六	液体50 mL×1瓶	2-8℃保存
NADP标准品	粉剂×1支	-20℃保存
NADPH标准品	粉剂×1支	-20℃保存

溶液的配制：

1、 试剂二：临用前加入4mL蒸馏水充分混匀，溶解后2-8℃保存4周。

2、 试剂四：临用前将试剂四A溶解到试剂四B中，溶解后加入5mL蒸馏水，分装保存，避免反复冻融，-20℃  保存4周。

3、 NADP标准品：临用前加入 1.27 mL 蒸馏水，即 5 µmol/mL，-20℃可以保存2周。

4、 NADPH标准品：临用前加入 1.2 mL 蒸馏水，即 5 µmol/mL，-20℃可以保存2周。

产品说明：

辅酶Ⅱ NADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NADP⁺和 NADPH 含量测定可以计算 NADP（NADPH + NADP⁺)含量和 NADPH/NADP⁺比值，其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP⁺比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一，而且在 PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。

分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP⁺和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用，使氧化型噻唑蓝（MTT）还原为甲瓒，570nm下检测吸光值，从而测定 NADPH 含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP⁺为NADPH，从而检测NADP⁺含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

 

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、研钵/匀浆器、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。