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- Sigma
- 进口
- N0142
- 2025年07月15日
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常温
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现货
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联硕生物
- 规格：
100μl
一般描述
神经丝由三个亚单位组成，即 NEFL（轻）、NEFM（中）和 NEFH（重）。 NEFH（神经细丝重）基因编码有髓鞘轴突中细胞骨架中最重要的神经元特异性中间丝。 该基因定位于人类染色体 22q12.2。单克隆抗神经丝蛋白 200（磷酸化和非磷酸化）（小鼠 IgG1 同种型）来源于小鼠骨髓瘤细胞与免疫小鼠脾细胞融合产生的杂交瘤。
特异性
显示广泛的物种交叉反应性，使用各种技术识别该神经特异性抗原的磷酸化形式和非磷酸化形式。免疫原
酶解去磷酸化猪神经丝 200 的 C-末端片段。应用
单克隆抗神经丝200（磷和非磷）抗体已经用于免疫组织化学 和蛋白质印迹。生化/生理作用
神经丝重链（NEFH）基因编码的重多肽神经丝参与脊髓运动神经元近端轴突区域细胞骨架和轴突结构的维持。NEFH 基因突变在散发性肌萎缩侧索硬化症 (ALS) 的发病机制中发挥着关键作用。NEFH 基因还是引起常染色体显性遗传轴突腓骨肌萎缩症 (CMT2cc)的原因。
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文献和实验离子与蛋白质部分结合，具有保护蛋白质不易变性的优点，因此在提取液中加入少量NaCl等中性盐，一般以0.15摩尔。升浓度为宜。缓冲液常采用0.02-0.05M磷酸盐和碳酸盐等渗盐溶液。（二）有机溶剂提取法一些和脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的蛋白质和酶，不溶于水、稀盐溶液、稀酸或稀碱中，可用乙醇、丙酮和丁醇等有机溶剂，它们具的一定的亲水性，还有较强的亲脂性、是理想的提脂蛋白的提取液。但必须在低温下操作。丁醇提取法对提取一些与脂质结合紧密的蛋白质和酶特别优越，一是因为丁醇亲脂性强，特别是溶解
瘤细胞，并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后，及时进行冻存。 点此查看完整实验步骤 6. 单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。 （1）体内诱生法 取Balb/c小鼠，首先腹腔注射0.5 ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量
的细胞群所产生的，所以它的免疫球蛋白属同一类型，质地纯一，而且它是针对某一抗原决定簇的，因此特异性强，亲合性也一致。单克隆抗体（McAb）的特性和常规血清抗体的特性比较见2-3。 表2-3 单克隆抗体（McAb）和常规免疫血清抗体的特性比较 单克隆抗体的制备方法如下。 （一）动物的选择与免疫 1．动物的选择 纯种BALB/C小鼠，较温顺，离窝的活动范围小，体弱，食量及排污较小，一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALA
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