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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 库存:
411
- 样本:
血清、血浆及相关液体样本
- 标记物:
详见操作说明
- 适应物种:
人、大鼠、小鼠、植物、动物等
- 应用:
仅供科研实验
- 检测方法:
双抗体夹心法
- 检测范围:
详见操作说明
- 规格:
96T/48T
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1980.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1580.0 |
人鞭毛蛋白(flagellin)酶联免疫分析试剂盒
Human flagellin ELISA KIT
产品优势
公司销售的所有产品均配有产品说明、技术资料。我们拥有稳定的科研队伍、先进的实验设备。将针对您的应用需求,为您提供专门的服务。高品质的ELISA试剂盒让您的实验结果更具科学性、准确性、专业性。将节省您大量的时间和精力更好地投入到实验工作中。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人鞭毛蛋白(flagellin)表达。
将目标抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 阳性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 阴性对照 | 0.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
实验所需自备试验器材
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒操作步骤
A.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
B.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
C.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
D.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
E.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
F.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
G.温育:操作同3。
H.洗涤:操作同5。
I.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
J.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
K.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人鞭毛蛋白(flagellin)酶联免疫分析试剂盒仅供科研实验!
实验结果计算
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
实验时出现的问题描述及解决方案
问题描述:变异系数大
可能原因:加液不正确
相应对策:检查加液情况
问题描述:背景值高
可能原因:检测抗体的工作浓度
酶标版洗涤不完全
洗液有污染
相应对策:使用推荐的稀释倍数
重新阅读操作手册,保证清洗完全;如果用自动洗板机,请检查所有的出口是否有堵塞
配置新鲜的洗液
试剂盒性能:请向客服人员索要详细电子版说明书!
人鞭毛蛋白(flagellin)酶联免疫分析试剂盒
产品保存温度:2-8℃
产品有效期:6个月
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文献和实验构成细菌的鞭毛纤维的粒状蛋白质。其分子量可因菌种而异,肠细菌群的是 5-6万,而芽孢杆菌属据报道为 3万左右。这种蛋白质的氨基酸组成也因菌种而异,但都含有多量的天冬氨酸、苏氨酸、谷氨酸,而不含半胱氨酸和色氨酸。在沙门氏菌的一些种中,鞭毛蛋白所含赖氨酸,约有半数在ε位被甲基化。鞭毛纤维是通过鞭毛蛋白分子卷成圆筒状聚合而成。聚合反应是通过疏水键进行的,此时分子的形态发生了变化。而且由于形态发生改变的分子只在分子的一端与另一分子形成键,所以纤维只朝一个方向延长。用强酸
flagellae|(复)鞭毛 flagellar antigen|鞭毛抗原,H抗原 flagellar basal body|鞭毛基体 flagellin|鞭毛蛋白 flagellum|鞭毛 flanking region|侧翼区,旁侧区 flanking sequence|侧翼序列,旁侧序列 flash chromatography|急骤层析(法) flash
荚膜抵御不良环境;保护自身不受白细胞吞噬;而且能有选择地粘附到特定细胞的表面上,表现出对靶细胞的专一攻击能力。细菌荚膜的纤丝还能把细菌分泌的消化酶贮存起来,以备攻击靶细胞之用。鞭毛是某些细菌的运动器官,由一种称为鞭毛蛋白(flagellin)的弹性蛋白构成,结构上不同于真核生物的鞭毛。细菌可以通过调整鞭毛旋转的方向(顺和逆时针)来改变运动状态。菌毛是菌体表面极其的蛋白纤细,须用电镜观察。特点是:细、短、直、硬、多,菌毛与细菌运动无关,根据形态、结构和功能,可分为普通菌毛和性菌毛两类。前者与细菌吸附
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